產(chǎn)品展示
Bcl-2,豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2ELISA試劑盒
點(diǎn)擊次數(shù)：72發(fā)布時(shí)間：2015/7/2 14:34:38
更新日期：2015/7/2 14:34:38
所 在 地：美洲
產(chǎn)品型號：
品牌名稱：TSZ
相關(guān)標(biāo)簽：Bcl-2 豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2ELISA試劑盒說明書
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
保存條件：2-8℃低溫保存
保質(zhì)期：6個(gè)月，所有試劑盒均提供*新批次。
試劑盒成分：酶標(biāo)板，試劑，標(biāo)準(zhǔn)品等。
二、間接法是檢測抗體*常用的方法，其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。操作步驟如下：
(1)將特異性抗原與固相載體連接，形成固相抗原：洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
(2)加稀釋的受檢血清：其中的特異抗體與抗原結(jié)合，形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后，固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質(zhì)由于不能與固相抗原結(jié)合，在洗滌過程中被洗去。
(3)加酶標(biāo)抗抗體：與固相復(fù)合物中的抗體結(jié)合，從而使該抗體問接地標(biāo)記上酶。洗滌后，固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體，可用酶標(biāo)羊抗人IgG抗體。
(4)加底物顯色：顏色深度代表標(biāo)本中受檢抗體的量。
本法只要更換不同的固相抗原，可以用一種酶標(biāo)抗抗體檢測各種與抗原相應(yīng)的抗體。
三、標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
3．組織處理：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
四、判定豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2ELISA試劑盒結(jié)果計(jì)算
對于新入行不久，對ELISA的結(jié)果分析這塊不太熟悉�？蛻舻膶�(shí)驗(yàn)是通過人源的蛋白作為抗原，兔源多克隆抗體作為一抗（我們就是為了通過做ELISA來檢測其效價(jià)），然后通過辣根過氧化物作為二抗及顯色組分。實(shí)驗(yàn)做完了，但不知道怎么分析結(jié)果，例如標(biāo)準(zhǔn)曲線怎么做之類的。另外，還想問一下，有沒有實(shí)用的軟件可用來分析。對于客戶的問題回答：
間接ELISA要是試劑盒，會(huì)有標(biāo)準(zhǔn)品的，把標(biāo)準(zhǔn)品按一定濃度梯度稀釋一塊兒做（一般有三個(gè)重復(fù)），*后酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)比色，用軟件（oringe）繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，的出公式，按公式將樣品帶入公式，
用于ELISA結(jié)果計(jì)算*方便的是logit曲線。曲線的橫坐標(biāo)用標(biāo)樣各濃度（ng/ml 或其他單位）的自然對數(shù)表示，縱坐標(biāo)用各濃度顯色值的logit值表示。Logit值的計(jì)算方法如下：
B/B0 B
Logit（B/B0）=ln———— =ln————
1-B/B0 B0-B
其中B0是0ng/ml孔的顯色值，B是其它濃度的顯色值。
五、豬B細(xì)胞淋巴瘤因子2ELISA試劑盒所需要樣本處理及要求:
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右 (2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。
3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清 。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。�?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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