產(chǎn)品展示
MHCⅡ/SLAⅡ,豬主要組織相容性復合體Ⅱ類ELISA試劑盒
點擊次數(shù):65發(fā)布時間:2015/7/2 10:44:13

更新日期:2015/7/2 10:44:13
所 在 地:美洲
產(chǎn)品型號:
品牌名稱:R&D
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細內(nèi)容
試劑盒種屬齊全|代測ELISA
有效期:2-8℃,六個月。
規(guī)格:48T 96T可以提供定量和定性。
檢測限:歡迎QQ或電話或郵箱索取原版說明書
ELISA試劑盒庫存充足,送貨及時
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二、工作原理
用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗體的微孔中依次加入標本或者標準品、生物素化的抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過徹底洗滌后用底物顯色。底物在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品濃度呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定OD值,計算樣品濃度。
三、測定抗體方面:所用的方法稱為間接法,也是目前*常用的方法
間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經(jīng)洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經(jīng)孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再經(jīng)孵育洗滌后,加底物顯色,底物降解的量,即為欲測抗體的量,其結(jié)果可用目測或用分光光度計定量測定,本法用不同種抗原包被固相載體后,只要用一種酶標記抗人球蛋白,即可作多種人的傳染病、寄生蟲病以及其他疾病的血清學診斷。如用酶標記抗人IgM,則可用于早期診斷。
四、豬主要組織相容性復合體Ⅱ類ELISA試劑盒的影響因素
Elisa試劑盒的測定,受很多方面影響,這也是ELISA檢測中的重要部分,可從以下一個方面加以說明。
試驗的重復性(精確度),有二種方法來檢驗試驗的精確度:通常用變異系數(shù)來表示:1、幾個樣品用ELISA法同時進行多次測定求出CV%;2、不同時間對不同操作者對某幾個樣進行多次測定求出變異系數(shù)。CV是個體參數(shù)標準差與平均數(shù)的比率。
S / X = CV ,CV應(yīng)低10%,不應(yīng)大于10~15%。
不論目測或分光光度計測定,均可作一個稀釋度或一系列稀釋度測定,一般常規(guī)診斷只用一個稀釋度判斷陽性或陰性就可以了,這樣比較方便,現(xiàn)在推薦傳染病的血清診斷用1:200一個稀釋度。有些需要精確定量的,可作一系列稀釋度測定。
記錄結(jié)果有下列幾種方法:
1、“+”或“-”:所有超過規(guī)定的O.D值(如O.D,0.4)的標本均屬陽性,此規(guī)定O.D值是根據(jù)事先測定大量陰性標本所取得的,此規(guī)定值是陰性標本的上限;蛘咭砸唤M陰性標本O.D平均值加2~3個標準差作為陽性閾值。
2、直接以O(shè).D值來表示,如0.4、0.7、1.2,O.D值越大,陽性反應(yīng)越強,但此數(shù)值是在固定實驗條件下得到的結(jié)果,而且每次實驗都要有參考標本作對照。
3、以終點滴度表示:將標本作連續(xù)稀釋,稀釋度能出現(xiàn)陽性反應(yīng)者(即OD值仍大于陽性閾值,即為該標本的滴度。
4、以“比值”表示:求出被檢標本的O.D值與一組陰性標本O.D值的比值,例如為陰性標本的2倍或3倍,即為陽性,比值小于2.1而大于1.5為可疑,<1.5為陰性。
如在此測定時以空白校正“O”點。
以“單位”來表示:在測定被檢標本的同時,再測定一個含已知單位數(shù)的陽性參考血清,用不同稀釋度作ELISA檢測后,以O(shè).D值為縱坐標,單位數(shù)為橫坐標,畫出標準曲線。以后可根據(jù)被檢標本的O.D值,從曲線上找出相應(yīng)的單位數(shù),再乘于血清的稀釋倍數(shù),即可得出被檢標本的單位數(shù)。
作試驗時的陰性參考血清不要顯色,否則會對結(jié)果判斷帶來困難,特別在目測時,當陽性標本O.D值>2.0時,應(yīng)作適當稀釋后再作測定。
五、豬主要組織相容性復合體Ⅱ類ELISA試劑盒的基本原理有三條:
(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學活性;
(2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學和酶學活性;
(3)酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結(jié)果。
由于ELISA法一方面是建立在抗原與抗體免疫學反應(yīng)的基礎(chǔ)上,因而,具有特異性。而另一方面又由于酶標記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結(jié)合物,它可以催化底物分子發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生放大作用,正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一種既敏感又特異的方法。
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