產(chǎn)品展示
IGF-1,牛胰島素樣生長(zhǎng)因子1ELISA試劑盒
點(diǎn)擊次數(shù):130發(fā)布時(shí)間:2015/6/27 12:00:35

更新日期:2015/6/27 12:00:35
所 在 地:美洲
產(chǎn)品型號(hào):
品牌名稱:R&D
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
Elisa試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
改良雙抗體夾心法:本法是雙抗體夾心法的一種改良形式,也是用于測(cè)定抗原的
本法首先是將特異性抗體a包被于固相載體,經(jīng)洗滌加入含有欲測(cè)抗原之待檢樣品。經(jīng)孵育洗滌后再加一次未標(biāo)記的特異性抗體b,而這次加入的抗體b于次包被于固相載體上的特異性抗體a對(duì)被測(cè)抗原來(lái)說(shuō)都是特異性的,但不是用同種動(dòng)物免疫制備的,否則可出現(xiàn)非特異性反應(yīng)。經(jīng)孵育洗滌后,再加酶標(biāo)記抗b抗體,再經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色進(jìn)行測(cè)定。這種方法與雙抗體夾心法不同之處是多加了一層抗體。因此,放大的倍數(shù)更高,故比雙抗體夾心法更加靈敏。同時(shí)避免標(biāo)記特異性抗體,而另一優(yōu)點(diǎn)是只要標(biāo)記一種抗抗體,即可達(dá)到多種應(yīng)用。
用于測(cè)定抗原的尚有第4種叫做抑制性測(cè)定法(見圖4),它是先用抗原包被固相載體,然后分為二組,一組加入用參考抗體和被檢標(biāo)本混合孵育后的混合溶液,假如標(biāo)本中不含抗原,則參考抗體未被結(jié)合。因此它可以和包被于固相載體上的抗原結(jié)合。如標(biāo)本中含有抗原,則抗原先與參考抗體結(jié)合,故參考抗體不再與包被于固相載體上的抗原結(jié)合。對(duì)加入酶結(jié)合物(抗球蛋白)和底物僅顯示剩余結(jié)合的抗體量。再與另一組不加待檢標(biāo)本的參考系統(tǒng)比較,被檢標(biāo)本對(duì)底物顯色的抑制程度與標(biāo)本中所含抗原量成比例,二者之差,即為欲測(cè)抗原的量。
牛胰島素樣生長(zhǎng)因子1ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備
1仔細(xì)閱讀說(shuō)明書
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說(shuō)明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
4標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存
5準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等
6根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說(shuō)明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑
牛胰島素樣生長(zhǎng)因子1ELISA試劑盒操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
結(jié)果判斷
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線:在Excel工作表中,以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo),對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo),繪制出標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸曲線,按曲線方程計(jì)算各樣本濃度值。
試劑盒性能
1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:檢測(cè)濃度小于1.0pg/ml。
3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個(gè)月
活動(dòng)備注:
1.本紅包代金券金額適用于購(gòu)買恒遠(yuǎn)旗下平臺(tái)所有產(chǎn)品抵扣。不得現(xiàn)金兌換。
2.掃描下方二維碼或搜索恒遠(yuǎn)微信公眾號(hào):hyelisakit 關(guān)注上海恒遠(yuǎn)生物微信平臺(tái)。
3.本活動(dòng)*終解釋權(quán)歸上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司所有。

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