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產(chǎn)品展示

AVEN, 凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體

點(diǎn)擊次數(shù):63發(fā)布時間:2015/4/16 9:45:06

AVEN, 凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體

更新日期:2016/10/13 9:37:22

所 在 地:美洲

產(chǎn)品型號:

品牌名稱:Abcam

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詳細(xì)內(nèi)容

凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體資料參考
產(chǎn)品名稱 凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體
產(chǎn)品縮寫 CD163
蛋 白 名 Scavenger receptor cysteine-rich type 1 protein M130
別    稱 M130,MM130,sCD163
免 疫 原 多肽
來    源 兔
特 異 性 抗人
克隆類型 多克隆
應(yīng)    用 WB免疫印跡
成    分 200μg/ml親和純化抗體,0.01M PBS,30%甘油。
保存條件 連續(xù)使用時4°C存儲,保質(zhì)期六個月;長期存儲時建議分裝為10ul以上小包裝-20°C存儲,并避免反復(fù)凍融,保質(zhì)期一年。
背景資料 The protein encoded by this gene is a member of the scavenger receptor cysteine-rich (SRCR) superfamily, and is exclusively expressed in monocytes and macrophages. It functions as an acute phase-regulated receptor involved in the clearance and endocytosis of hemoglobin/haptoglobin complexes by macrophages, and may thereby protect tissues from free hemoglobin-mediated oxidative damage. This protein may also function as an innate immune sensor for bacteria and inducer of local inflammation. Alternatively spliced transcript variants encoding different isoforms have been described for this gene.
凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體分類
抗體分類:根據(jù)重鏈恒定區(qū)的血清學(xué)類型,可將抗體分為IgM,IgGIgA,IgD,IgE五類,它們的重鏈分別為mu, gamma, alpha, delta, epsilon鏈。在上述每一類別中,按重鏈構(gòu)造上的變異又可分為幾個亞類,例如人的IgG可分為IgG1,IgG2,IgG3IgG4四個亞類。
輕鏈分為兩種類型,kappa鏈和lambda鏈,但每種抗體中只存在一種類型的輕鏈。
二抗:二抗是在其它宿主體內(nèi)制備的能與一抗或一抗片段結(jié)合的抗體,上面通常連有酶或熒光素等標(biāo)簽。由于二抗所具備的優(yōu)點(diǎn)使得其在免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)中得以應(yīng)用廣泛,如western blot(通過與特異性抗體結(jié)合來鑒定蛋白質(zhì)),ELISA(以耦聯(lián)有酶的抗體或抗原為標(biāo)記來檢測特異性的蛋白質(zhì),尤其是相應(yīng)的抗原或抗體),免疫組織化學(xué)(檢測組織中的特異性抗原),免疫細(xì)胞化學(xué)(通過免疫學(xué)方法檢測細(xì)胞的抗原組成),流式細(xì)胞術(shù)(通過檢測激光所激發(fā)熒光來鑒定分離不同類型的細(xì)胞)及免疫沉淀(通過抗原與抗體的特異性結(jié)合作用來分離相應(yīng)抗原)。二抗針對某一特定物種(如小鼠)的所有抗體均具有特異性,因而使用標(biāo)記的二抗可以免去對每一個一抗進(jìn)行標(biāo)記,大大節(jié)省了時間和費(fèi)用;此外,一個一抗分子可以同時結(jié)合幾個二抗分子,從而使信號大大增強(qiáng),提高了實(shí)驗(yàn)靈敏度。
二抗可以耦聯(lián)有幾種不同的標(biāo)記,可以是酶,熒光素,或生物素。
其他抗體保存方法
帶標(biāo)記的抗體
帶標(biāo)記的抗體一般儲存在黑色容器中或者用錫箔紙蓋住。
酶標(biāo)記抗體
堿性磷酸酶和其他酶結(jié)合物對于冷凍特別敏感,一般應(yīng)在4°C短期存儲。
標(biāo)記抗體長期保存是在終濃度為50%的甘油或乙二醇中于-20°C保存。雖然某些酶結(jié)合物可在無保護(hù)劑的情況下于-20°C儲存,但必須分裝,以防止反復(fù)凍融。
熒光標(biāo)記抗體
熒光遇光容易分解,熒光標(biāo)記的試劑(不只是抗體)必須避光保存,其應(yīng)該存放在4°C、避免讓其凝固。
凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體參考效價選擇
Flow Cytometry:1:40-80 
Western blotting:1:100-400 
Immunocytochemistry in fixed cells:1:50-200 
enzyme-linked immuno sorbent assay:1:2000
Immunohistochemistry in paraffin section:1:50-200 
如何選擇二抗
通常情況下,某一特定的實(shí)驗(yàn)中可能同時有幾種二抗可供選擇,如何能選擇到*適合該實(shí)驗(yàn)的二抗,需要綜合以下幾個方面進(jìn)行考慮:
一抗的物種來源
一抗是在什么物種來源的,相應(yīng)的二抗也要是抗該物種的抗體。例如,如果一抗是在小鼠體內(nèi)制備的,那么你就應(yīng)當(dāng)選擇抗小鼠的二抗,如果一抗是在兔體內(nèi)制備的,那么二抗就應(yīng)當(dāng)是抗兔的抗體。至于二抗本身是在什么動物中制備的對二抗的質(zhì)量并無明顯的影響。
一抗是屬于哪個類或亞類
二抗需與一抗的類別或亞類相匹配。這通常是針對單克隆抗體而言。多克隆抗體主要是IgG類免疫球蛋白,因此相應(yīng)的二抗就是抗IgG抗體。
單克隆抗體的類別及亞類通常會在產(chǎn)品列表中列出,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相應(yīng)的二抗就應(yīng)當(dāng)是抗小鼠IgM,或是抗小鼠IgG抗體。
如果單克隆一抗是小鼠IgG的某一亞類(IgG1,IgG2a,IgG2bIgG3),那么幾乎所有的抗小鼠IgG都可以與之結(jié)合,或者你也可以選擇專門針對這一亞類的二抗,例如,如果你的一抗是小鼠IgG1,那么你可以選擇抗IgG1的二抗,此種抗體在雙標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中尤其適合。
如果你不知道一抗是哪一類別或亞類,那么抗小鼠IgG是一個不錯的選擇,因?yàn)榇朔N抗體可以識別大多數(shù)類型的IgG免疫球蛋白。
如何分裝凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑抗體
請根據(jù)一次實(shí)驗(yàn)的常用量進(jìn)行分裝。每等份不應(yīng)少于 10 µl;每等份的量越少,抗體儲液濃度受蒸發(fā)和管壁吸附的影響越大。
步:選擇抗體。
三種二抗抗體:Whole IgG,F(xiàn)(ab&;rsquo;)2片段,F(xiàn)ab片段。
 Whole IgG抗體適用于多數(shù)情況,是性價比的。Whole IgG是完整的抗體分子,有一個Fc部分和兩個與抗原結(jié)合的Fab部分 (Figure 1, Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc網(wǎng)站)。
F(ab&;rsquo;)2片段抗體是胃蛋白酶消化IgG除去Fc部分,剩下靠二硫鍵連接的結(jié)合抗原的兩個Fab部分。F(ab&;rsquo;)2片段抗體用在避免抗體與Protain A 或G結(jié)合,或者與有Fc受體的活細(xì)胞結(jié)合。如果一抗是完整的抗體分子,不管二抗是哪種形式都可能結(jié)合Fc受體。
 Fab片段抗體是用木瓜蛋白酶消化IgG后得到的。這些抗體只含有一個Fab結(jié)合位點(diǎn)。它們用來封閉內(nèi)源性的免疫球蛋白,或者在使用相同物種來源的一抗多標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)中封閉暴露的免疫球蛋白。
第二步:一抗的物種來源。
 為了正確的選擇二抗,必須知道一抗的物種來源。如果一抗是小鼠來源的,就找&;ldquo;anti-mouse&;rdquo;。
第三步:選擇二抗的物種來源。
第四步:選擇二抗的特異性。
    因?yàn)椴煌锓N來源的免疫球蛋白含有相似的結(jié)構(gòu),抗一個物種的抗體可能與其他物種發(fā)生交叉反應(yīng),除非事先特殊處理過(如標(biāo)有&;ldquo;min X Hu, Bov&;hellip;Sr Prot&;rdquo; - minimal cross-reactivity to human and bovine serum proteins) ), 經(jīng)過用圓括號中的物種 (human, bovine) 的血清蛋白的吸附處理來降低交叉反應(yīng))。在選擇二抗時,只有在來自兩個很相近的物種的一抗都存在而需要檢測其中一種時,才使用針對其中一種特殊吸附處理過的抗體。這樣的抗體可能不能和所有亞型的IgG都很好的反應(yīng)。比如,在含有內(nèi)源性免疫球蛋白的大鼠的組織樣本中,使用針對大鼠吸附處理過的anti-mouse IgG來檢測小鼠的一抗,或者在多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中使用了大鼠的一抗時。當(dāng)不含有大鼠免疫球蛋白時,采用沒有針對大鼠IgG處理過的anti-mouse二抗來檢測小鼠的一抗。牛血清白蛋白(BSA)和奶粉中可能含有牛IgG。直接針對牛,山羊,馬和綿羊的二抗會跟牛IgG反應(yīng)。因此,使用BSA或者奶粉來封閉或者稀釋這些抗體可能導(dǎo)致背景染色明顯增加,以及抗體效價的降低。這時,推薦使用5%的二抗來源物種的正常血清來封閉。
Anti-IgG (H+L)這類抗體和IgG分子的重鏈和輕鏈[比如Fc和F(ab&;rsquo;)2/Fab部分]都可以反應(yīng)。也可以和其他的免疫球蛋白家族(比如IgM和IgA)反應(yīng),因?yàn)樗械拿庖咔虻鞍锥加邢嗤妮p鏈(&;kappa;鏈或者&;lambda;鏈)。Anti-IgG (H+L) 比只抗片段的抗體識別更多的抗原表位。
Anti-IgG,F(xiàn)c fragment specific這類抗體和IgG重鏈的Fc部分反應(yīng)。它們通過了ELISA檢測,和(或)針對Fab片段吸附的測試。某些情況下,需要額外檢測和處理來降低和IgM或IgA的交叉反應(yīng),會被描述為&;ldquo;Anti-IgG, Fc&;gamma;fragment specific&;rdquo;。注意:不是所有anti-IgG, Fc抗體和所有亞型的IgG反應(yīng)能力一致。要找和四種IgG亞類反應(yīng)能力差不多的anti-mouse IgG, Fc&;gamma;抗體的話,應(yīng)當(dāng)選Goat Anti-Mouse IgG (subclasses 1+2a+2b+3), Fc&;gamma;fragment specific (min X Hu,Bov,Rb Sr Prot)。
Anti-IgG,F(xiàn)c&;gamma; Subclass specific抗體分別和不同的小鼠IgG亞型重鏈的Fc部分反應(yīng)。這類抗體經(jīng)過ELISA和/或針對Fab片段、IgM和其他小鼠IgG亞型的吸附測試。
Anti-IgG,F(xiàn)(ab&;rsquo;)2 fragment specific和IgG的F(ab&;rsquo;)2/Fab部分反應(yīng)。這類抗體經(jīng)過了ELISA和/或Fc片段的吸附檢測。因?yàn)楹洼p鏈反應(yīng),它們同時也和具有相同輕鏈的其他種類的免疫球蛋白反應(yīng)(如IgM和IgA)。
(min X&;hellip;Sr Prot)這類抗體經(jīng)過了檢測,以及針對IgG和圓括號中的物種的血清蛋白的吸附處理。當(dāng)其他物種免疫球蛋白的出現(xiàn)可能導(dǎo)致交叉反應(yīng)時,推薦使用這類抗體。但是,當(dāng)要選擇經(jīng)過針對相近物種吸附處理的抗體時,要特別注意,因?yàn)樗鼈兡茏R別的表位數(shù)量大大減小了,可能識別單抗的能力很弱。這種情況的例子有Anti-Mouse IgG (min X Rat,&;hellip;.Sr Prot), Anti-Rat IgG (min X Mouse, &;hellip;Sr Prot), 和 Anti-Ramenian Hamster IgG (min X Mouse, Rat, &;hellip;Sr Prot)。
ML (Multiple Labeling多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)): 有些抗體標(biāo)明了ML,來強(qiáng)調(diào)它們除了可以用于單標(biāo),還可用于多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。
第五步:選擇需要的探針。
第六步:選擇的抗體的規(guī)格、價錢和目錄號。

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