產(chǎn)品展示
alpha-2腎上腺素能受體抗體
點(diǎn)擊次數(shù):107發(fā)布時(shí)間:2015/3/18 21:25:39

更新日期:2016/5/25 10:59:14
所 在 地:美洲
產(chǎn)品型號(hào):
品牌名稱:Abcam
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
英文名: alpha-2腎上腺素能受體抗體
克隆性:?jiǎn)慰寺、多克?/span>
品 牌:Abcam
數(shù) 量:1000
宿 主:來(lái)電咨詢
保質(zhì)期:3年
規(guī) 格:0.1ml/0.2ml
抗原來(lái)源:來(lái)電咨詢
應(yīng)用范圍:來(lái)電咨詢
alpha-2腎上腺素能受體抗體保存條件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable Important Note This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
抗體的保存方法
抗體濃度
抗體濃度過(guò)低(<1毫克/毫升)更容易發(fā)生抗體的失活以及增加物理吸附造成的損失。因此,我們都要盡量的保持抗體(例如,1-5毫克/毫升)在儲(chǔ)存期間的濃度。通常的做法是添加“載體”蛋白質(zhì),如純化牛血清白蛋白(BSA)以防止這種降解和損失。
多克隆抗體
多克隆抗體在血清中于-20℃保存十年其活性損失不大。然而,一旦抗體被純化后,儲(chǔ)存在50%的甘油中于-20℃保存,即使沒(méi)有凍融,其活性的損失也可以觀察到,盡管其進(jìn)程仍然非常緩慢。即使沒(méi)有甘油,只要你不反復(fù)凍融,抗體也可以存儲(chǔ)在-20℃幾年甚至幾十年。另一個(gè)重要的事情是,該抗體濃度應(yīng)高于1毫克/毫升,因?yàn)橄〉目贵w容易失去活性而且容易造成物理吸附導(dǎo)致的損失。
單克隆抗體
單克隆抗體可以保存在50%的甘油存放于-20℃。也可以將其保存在飽和硫酸銨于4℃或-20℃保存。多年未見(jiàn)有失活、細(xì)菌滋生以及氧化。而凍干法(冷凍干燥,干燥或從冰凍狀態(tài))為一些冰凍以后不穩(wěn)定抗體提供了一種替代的保存方法。在大多數(shù)情況下,凍干的抗體是存放在-20℃。雖然冷凍干燥有許多優(yōu)點(diǎn),它需要昂貴的設(shè)備和勞動(dòng)力。
帶標(biāo)記的抗體
帶標(biāo)記的抗體一般儲(chǔ)存在黑色容器中或者用錫箔紙蓋住。
酶標(biāo)記抗體
堿性磷酸酶和其他酶結(jié)合物對(duì)于冷凍特別敏感,一般應(yīng)在4C短期存儲(chǔ)。
標(biāo)記抗體長(zhǎng)期保存是在終濃度為50%的甘油或乙二醇中于-20C保存。雖然某些酶結(jié)合物可在無(wú)保護(hù)劑的情況下于-20C儲(chǔ)存,但必須分裝,以防止反復(fù)凍融。
熒光標(biāo)記抗體
熒光遇光容易分解,熒光標(biāo)記的試劑(不只是抗體)必須避光保存,其應(yīng)該存放在4C、避免讓其凝固。
alpha-2腎上腺素能受體抗體運(yùn)輸方式:低溫保存運(yùn)輸。應(yīng)在低溫下保存,長(zhǎng)時(shí)間在暴露在空氣中,含量會(huì)有所降低。
步:選擇抗體。
三種二抗抗體:Whole IgG,F(xiàn)(ab&;rsquo;)2片段,F(xiàn)ab片段。
Whole IgG抗體適用于多數(shù)情況,是性價(jià)比的。Whole IgG是完整的抗體分子,有一個(gè)Fc部分和兩個(gè)與抗原結(jié)合的Fab部分 (Figure 1, Jackson ImmunoResearch Laboratories Inc網(wǎng)站)。
F(ab&;rsquo;)2片段抗體是胃蛋白酶消化IgG除去Fc部分,剩下靠二硫鍵連接的結(jié)合抗原的兩個(gè)Fab部分。F(ab&;rsquo;)2片段抗體用在避免抗體與Protain A 或G結(jié)合,或者與有Fc受體的活細(xì)胞結(jié)合。如果一抗是完整的抗體分子,不管二抗是哪種形式都可能結(jié)合Fc受體。
Fab片段抗體是用木瓜蛋白酶消化IgG后得到的。這些抗體只含有一個(gè)Fab結(jié)合位點(diǎn)。它們用來(lái)封閉內(nèi)源性的免疫球蛋白,或者在使用相同物種來(lái)源的一抗多標(biāo)記的實(shí)驗(yàn)中封閉暴露的免疫球蛋白。
第二步:一抗的物種來(lái)源。
為了正確的選擇二抗,必須知道一抗的物種來(lái)源。如果一抗是小鼠來(lái)源的,就找&;ldquo;anti-mouse&;rdquo;。
第三步:選擇二抗的物種來(lái)源。
第四步:選擇二抗的特異性。
因?yàn)椴煌锓N來(lái)源的免疫球蛋白含有相似的結(jié)構(gòu),抗一個(gè)物種的抗體可能與其他物種發(fā)生交叉反應(yīng),除非事先特殊處理過(guò)(如標(biāo)有&;ldquo;min X Hu, Bov&;hellip;Sr Prot&;rdquo; - minimal cross-reactivity to human and bovine serum proteins) ), 經(jīng)過(guò)用圓括號(hào)中的物種 (human, bovine) 的血清蛋白的吸附處理來(lái)降低交叉反應(yīng))。在選擇二抗時(shí),只有在來(lái)自兩個(gè)很相近的物種的一抗都存在而需要檢測(cè)其中一種時(shí),才使用針對(duì)其中一種特殊吸附處理過(guò)的抗體。這樣的抗體可能不能和所有亞型的IgG都很好的反應(yīng)。比如,在含有內(nèi)源性免疫球蛋白的大鼠的組織樣本中,使用針對(duì)大鼠吸附處理過(guò)的anti-mouse IgG來(lái)檢測(cè)小鼠的一抗,或者在多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)中使用了大鼠的一抗時(shí)。當(dāng)不含有大鼠免疫球蛋白時(shí),采用沒(méi)有針對(duì)大鼠IgG處理過(guò)的anti-mouse二抗來(lái)檢測(cè)小鼠的一抗。牛血清白蛋白(BSA)和奶粉中可能含有牛IgG。直接針對(duì)牛,山羊,馬和綿羊的二抗會(huì)跟牛IgG反應(yīng)。因此,使用BSA或者奶粉來(lái)封閉或者稀釋這些抗體可能導(dǎo)致背景染色明顯增加,以及抗體效價(jià)的降低。這時(shí),推薦使用5%的二抗來(lái)源物種的正常血清來(lái)封閉。
Anti-IgG (H+L)這類抗體和IgG分子的重鏈和輕鏈[比如Fc和F(ab&;rsquo;)2/Fab部分]都可以反應(yīng)。也可以和其他的免疫球蛋白家族(比如IgM和IgA)反應(yīng),因?yàn)樗械拿庖咔虻鞍锥加邢嗤妮p鏈(&;kappa;鏈或者&;lambda;鏈)。Anti-IgG (H+L) 比只抗片段的抗體識(shí)別更多的抗原表位。
Anti-IgG,F(xiàn)c fragment specific這類抗體和IgG重鏈的Fc部分反應(yīng)。它們通過(guò)了ELISA檢測(cè),和(或)針對(duì)Fab片段吸附的測(cè)試。某些情況下,需要額外檢測(cè)和處理來(lái)降低和IgM或IgA的交叉反應(yīng),會(huì)被描述為&;ldquo;Anti-IgG, Fc&;gamma;fragment specific&;rdquo;。注意:不是所有anti-IgG, Fc抗體和所有亞型的IgG反應(yīng)能力一致。要找和四種IgG亞類反應(yīng)能力差不多的anti-mouse IgG, Fc&;gamma;抗體的話,應(yīng)當(dāng)選Goat Anti-Mouse IgG (subclasses 1+2a+2b+3), Fc&;gamma;fragment specific (min X Hu,Bov,Rb Sr Prot)。
Anti-IgG,F(xiàn)c&;gamma; Subclass specific抗體分別和不同的小鼠IgG亞型重鏈的Fc部分反應(yīng)。這類抗體經(jīng)過(guò)ELISA和/或針對(duì)Fab片段、IgM和其他小鼠IgG亞型的吸附測(cè)試。
Anti-IgG,F(xiàn)(ab&;rsquo;)2 fragment specific和IgG的F(ab&;rsquo;)2/Fab部分反應(yīng)。這類抗體經(jīng)過(guò)了ELISA和/或Fc片段的吸附檢測(cè)。因?yàn)楹洼p鏈反應(yīng),它們同時(shí)也和具有相同輕鏈的其他種類的免疫球蛋白反應(yīng)(如IgM和IgA)。
(min X&;hellip;Sr Prot)這類抗體經(jīng)過(guò)了檢測(cè),以及針對(duì)IgG和圓括號(hào)中的物種的血清蛋白的吸附處理。當(dāng)其他物種免疫球蛋白的出現(xiàn)可能導(dǎo)致交叉反應(yīng)時(shí),推薦使用這類抗體。但是,當(dāng)要選擇經(jīng)過(guò)針對(duì)相近物種吸附處理的抗體時(shí),要特別注意,因?yàn)樗鼈兡茏R(shí)別的表位數(shù)量大大減小了,可能識(shí)別單抗的能力很弱。這種情況的例子有Anti-Mouse IgG (min X Rat,&;hellip;.Sr Prot), Anti-Rat IgG (min X Mouse, &;hellip;Sr Prot), 和 Anti-Ramenian Hamster IgG (min X Mouse, Rat, &;hellip;Sr Prot)。
ML (Multiple Labeling多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)): 有些抗體標(biāo)明了ML,來(lái)強(qiáng)調(diào)它們除了可以用于單標(biāo),還可用于多標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。
第五步:選擇需要的探針。
第六步:選擇的抗體的規(guī)格、價(jià)錢和目錄號(hào)。