產(chǎn)品展示
人Ⅲ型前膠原氨基端肽ELISA試劑盒
點擊次數(shù)：51發(fā)布時間：2015/3/16 13:09:55
更新日期：2016/10/13 9:38:33
所 在 地：美洲
產(chǎn)品型號：
品牌名稱：R&D
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
1仔細(xì)閱讀說明書
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說明書確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
4標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存)，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者，注意低溫保存
5準(zhǔn)備好所有實驗額外所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等
6根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說明書將所用試劑平衡至室溫，配制所需試劑
人Ⅲ型前膠原氨基端肽ELISA試劑盒的影響因素
Elisa試劑盒的測定，受很多方面影響，這也是ELISA檢測中的重要部分，可從以下一個方面加以說明。
結(jié)合物：在ELISA中，用酶標(biāo)記的抗體或抗原統(tǒng)稱為結(jié)合物，此為進(jìn)行ELISA檢測的關(guān)鍵試劑。常規(guī)使用ELISA法的主要問題是能夠簡便地制備酶結(jié)合物，而此種制備好的酶結(jié)合物要求穩(wěn)定，具有很高的酶活性，抗原或抗體的特異性，產(chǎn)量高及成本低。
用什么樣的酶來標(biāo)記抗原或抗體呢？可根據(jù)以下幾點來選擇適當(dāng)?shù)拿浮?/font>
1、酶制品的純度及活力高，催化效力也高，放大倍數(shù)大（即一個酶分子能催化幾十幾百個底物分子發(fā)生反應(yīng)的酶）。
2、酶及制備好的酶結(jié)合物在檢測或貯存中能保持穩(wěn)定。
3、酶制劑易得、價廉.
4、既要適用于標(biāo)記抗原，又適用于標(biāo)記抗體，標(biāo)記后不影響抗原或抗體的免疫學(xué)特性，也不降低酶的活性。
5、酶的反應(yīng)產(chǎn)物穩(wěn)定，檢測時簡便、快速。在定量測定中產(chǎn)物必須是可溶性的。
6、要有安全、價廉、易得的底物。
符合上述條件的酶有：堿性磷酸酶，一般用分子量為5×105（Alkaline Phospatase,簡稱AP），辣根過氧化物酶（Horse Radish Peroxidase,簡稱HRP,分子量為4×104）,另外尚有葡萄糖氧化酶，β-半乳糖甙酶，糖化酶及乙酰膽堿酯酶等等。其中以前兩種（AP和HRP）*為常用。
AP活力高，制備好的酶結(jié)合物可加NaN3防腐，但此種酶不易獲得，因其是從小牛腸粘膜中或大腸桿菌中提取，而且價格比較昂貴。因此，目前國內(nèi)外大多使用HRP。HRP活性也高，價格較便宜。但制得酶結(jié)合物不能加NaN3防腐。因NaN3能抑制HRP的活性，但可作低溫保存或加60%緩沖甘油等量混合后少量分裝，保存冰箱，一般可用1-2年。
由于HRP*為常用，故先把HRP的一般性質(zhì)介紹一下，以便在制備酶結(jié)合物時可引起注意。
(HRP的性質(zhì)):HRP系從辣根菜的根中所提取，這種酶是無色酶蛋白與暗棕色的鐵卟啉（E鐵血素）相結(jié)合的一種醣蛋白，可簡寫成由多個（6-7個）同功 酶所組成。分子量約為40000，等電點為PH7.2。能被58-62%飽和硫酸銨沉淀，在PH3.5-12均較穩(wěn)定。63℃15分鐘，室溫數(shù)周、甲苯和其他苯類有機(jī)溶劑處理都不影響它的活性。
