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ELISA方法檢測(cè)小鼠bFGF活性說(shuō)明

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上傳時(shí)間:2016/4/15 15:13:12

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上 傳 者:勁馬免疫學(xué)第三方檢測(cè)中心

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 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)bFGF)酶聯(lián)

 

 

試劑使用說(shuō)書(shū)

 

 

使

 

 

檢測(cè)范                                                                                                                    96T

 

3 IU/L -80 IU/L

 

 

使用目測(cè)定小、漿關(guān)性成纖維細(xì)長(zhǎng)bFGF

。

實(shí)驗(yàn)原本試劑盒應(yīng)用體夾心法測(cè)定標(biāo)本堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)bFGF水平。

用純化的小堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子bFGF)抗包被微孔板,制成固相抗體,往包單抗中依加入堿性成纖維細(xì)胞長(zhǎng)因子bFGF,再 HRP 標(biāo)記的堿性成纖維細(xì) 胞生長(zhǎng)因子(bFGF結(jié),形成--酶標(biāo)體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)徹底洗TMB 顯色。TMB HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。品中細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF相關(guān)。標(biāo)儀在 450nm 長(zhǎng) 測(cè)光度OD ,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)樣品成纖維細(xì)胞長(zhǎng)bFGF) 活濃度。

試劑盒

 

1

30 滌液

20ml×1

7

6ml×1

2

標(biāo)

6ml×1

8

標(biāo)準(zhǔn)160IU/L

0.5ml×1

3

標(biāo)

12 ×8

9

標(biāo)準(zhǔn)

1.5ml×1

4

6ml×1

10

說(shuō)書(shū)

1

5

A

6ml×1

11

2

6

B

6ml×1/

12

1 個(gè)

標(biāo)本要

1標(biāo)本采集后進(jìn)行,提按相關(guān)獻(xiàn)進(jìn),提取應(yīng)快進(jìn)實(shí)驗(yàn)不能 馬上進(jìn)試驗(yàn),將標(biāo)本放于-20應(yīng)復(fù)凍融

2測(cè)含 NaN3 ,因 NaN3 過(guò)HRP

操作步

1.     標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn),用戶(hù)可進(jìn)稀 釋。

 

80IU/L

5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)

150µl 標(biāo)準(zhǔn) 150µl 標(biāo)準(zhǔn)釋液

40IU/L

4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)

150µl 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)釋液

20IU/L

3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)

150µl 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)釋液

10 IU/L

2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)

150µl 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)釋液

5IU/L

1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)

150µl 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)釋液


 

2.     設(shè)(空對(duì)標(biāo)試,相同、標(biāo)準(zhǔn)孔、

測(cè)。標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn) 50µl,測(cè)品稀 40µl, 測(cè) 1l樣品* 5 。加標(biāo),盡 量壁,動(dòng)。

3.     37 30

4.     30 倍濃縮餾水 30

5.     小心封板,棄液體,孔加滿(mǎn)液, 30 棄去,此 重復(fù) 5 ,。

6.     標(biāo) 50µl。

7.     作同 3。

8.     作同 5。

9.     顯色 A50µl,色劑 B50µl輕輕震混勻,37℃避

10 .

10.   50µl,應(yīng)時(shí)藍(lán)轉(zhuǎn)。

11.   測(cè)調(diào)零450nm 長(zhǎng)測(cè)OD 。 測(cè)應(yīng)終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)

操作程總結(jié)

 

 

計(jì)


標(biāo)準(zhǔn)物濃度橫坐標(biāo),OD 縱坐標(biāo),在標(biāo)紙繪出標(biāo)準(zhǔn)線(xiàn),據(jù)樣OD 標(biāo)準(zhǔn)線(xiàn)應(yīng)的;乘以倍數(shù);標(biāo)準(zhǔn) OD 計(jì)出標(biāo) 準(zhǔn)線(xiàn)線(xiàn) OD 程式,計(jì),乘以數(shù), 即實(shí)度。

注意事項(xiàng)

1.試盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平15-30 后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未 用完,應(yīng)。

2濃洗滌會(huì)結(jié)析出,時(shí),時(shí)結(jié)果。

3各步加樣均應(yīng)使用加,并經(jīng)對(duì)其準(zhǔn)確性,免試驗(yàn)誤差。加樣時(shí) 控制在 5 分鐘內(nèi),標(biāo)數(shù),使用排槍樣。

4 請(qǐng)測(cè)時(shí)標(biāo)準(zhǔn)線(xiàn),*復(fù)標(biāo)測(cè)物質(zhì)過(guò)(樣 OD 標(biāo)準(zhǔn) OD ,請(qǐng)數(shù)n 測(cè)定,計(jì) 算時(shí)請(qǐng)*后數(shù)×n×5。

5 使。

6請(qǐng)

7嚴(yán)說(shuō)書(shū)作進(jìn)行驗(yàn)結(jié)標(biāo)數(shù)為準(zhǔn) .

8,應(yīng)理。

9號(hào)不得混保存條及有效

1試劑盒保存;2-8℃。

26 個(gè)月

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