產(chǎn)品展示
優(yōu)質供應
詳細內(nèi)容
ELISA手工檢測過程復雜,影響因素較多,即使室內(nèi)質控在控,也可能因孔間差異而造成結果的差異,因此加大復查力度是保證結果準確性的可靠方法,可疑、弱陽性標本及少見模式的檢測結果進行復查。
“牛的牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒”標本收集:
1.收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管!
2.血漿抗凝劑推薦使用EDTA。避免使用溶血,高血脂標本。
3.標本應清澈透明,懸浮物應離心去除!
4.標本收集后若不及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃,-70℃電冰箱內(nèi),避免反復凍融,3-6月內(nèi)檢測。
二、ELISA試劑盒所需要樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
2. 血漿:應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右 (2000-3000轉/分)去除顆粒。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清 。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
三、“牛的牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒”特點
1.一般有兩種金標二抗,配Goat-anti-Rabbit和Goat-anti-Mouse抗體
2.精細純化并經(jīng)過預吸附的抗體
3.同rabbit 和mouse的單抗和多抗一起使用
4.很低的背景
5.電鏡級別,非常適于電鏡下的單標或者雙標
計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
四、實驗前的準備
1.要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩(wěn)定。
2. “牛的牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)ELISA試劑盒”實驗時,要使底物避光保存。
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