產(chǎn)品展示
優(yōu)質(zhì)供應
詳細內(nèi)容
各種類型ELISA測定時一般需經(jīng)過這些步驟:固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。
1.重復某一樣品時,加樣時間盡可能與次接近。
2.加樣后在混勻器上充分混勻。
二、Elisa間接法、競爭法、捕獲法,捕獲法測IgM抗體
血清中針對某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時存在,后者會干擾IgM抗體的測定。因此測定IgM抗體多用捕獲法,先將所有血清IgM(包括特異性IgM和非特異性IgM)固定在固相上,在去除IgG后再測定特異性IgM。操作步驟如下:
(1)將抗人IgM抗體連接在固相載體上,形成固相抗人IgM。洗滌。
(2)加入稀釋的血清標本:保溫反應后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分。
(3)加入特異性抗原試劑:它只與固相上的特異性IgM結(jié)合。洗滌。
(4)加入針對特異性的酶標抗體:使之與結(jié)合在固相上的抗原反應結(jié)合。洗滌 (5)加底物顯色:如有顏色顯示,則表示血清標本中的特異性IgM抗體存在,是為陽性反應。
三、注意事項
1.操作“兔子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒”時必須戴手套,穿工作衣,嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。
2.試驗結(jié)果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
3.樣品稀釋液應用加液器加注,并經(jīng)常校對其準確性。
四、ELISA操作技巧
1.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
2.顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
3.加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
4.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
五、ELISA方法特點
1.基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達,表達產(chǎn)物包含更多的抗原決定簇,可提高試劑盒的靈敏度,提高檢出率。
2.分子量大:合成肽采用化學方法制備,由于工藝的局限,合成數(shù)量有限,只能達到數(shù)百個氨基酸。而利用基因工程制備的抗原,分子量更大。
如果您購買了“兔子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒之后沒時間做實驗,我公司可以安排專業(yè)的技術(shù)人員為您進行免費代檢測。
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