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優(yōu)質供應
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ELISA手工檢測過程復雜,影響因素較多,即使室內質控在控,也可能因孔間差異而造成結果的差異,因此加大復查力度是保證結果準確性的可靠方法,可疑、弱陽性標本及少見模式的檢測結果進行復查。
“兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒”標本收集:
1.收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。
2.血漿抗凝劑推薦使用EDTA。避免使用溶血,高血脂標本!
3.標本應清澈透明,懸浮物應離心去除。
4.標本收集后若不及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃,-70℃電冰箱內,避免反復凍融,3-6月內檢測。
二、間接法是檢測抗體*常用的方法,其原理為利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體,故稱為間接法。操作步驟如下:
(1)將特異性抗原與固相載體連接,形成固相抗原:洗滌除去未結合的抗原及雜質。
(2)加稀釋的受檢血清:其中的特異抗體與抗原結合,形成固相抗原抗體復合物。經洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體。其他免疫球蛋白及血清中的雜質由于不能與固相抗原結合,在洗滌過程中被洗去。
(3)加酶標抗抗體:與固相復合物中的抗體結合,從而使該抗體問接地標記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量就代表特異性抗體的量。例如欲測人對某種疾病的抗體,可用酶標羊抗人IgG抗體。
(4)加底物顯色:顏色深度代表標本中受檢抗體的量。
本法只要更換不同的固相抗原,可以用一種酶標抗抗體檢測各種與抗原相應的抗體。
三、“兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒”特點
1.一般有兩種金標二抗,配Goat-anti-Rabbit和Goat-anti-Mouse抗體
2.精細純化并經過預吸附的抗體
3.同rabbit 和mouse的單抗和多抗一起使用
4.很低的背景
5.電鏡級別,非常適于電鏡下的單標或者雙標
計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。
四、實驗前的準備
1.要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩(wěn)定。
2. “兔子氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒”實驗時,要使底物避光保存。
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