產(chǎn)品展示
小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒
點(diǎn)擊次數(shù)：114發(fā)布時(shí)間：2015/3/12 20:53:40
更新日期：2019/4/3 17:18:53
所 在 地：美洲
產(chǎn)品型號(hào)：
品牌名稱：R&D
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
ELISA手工檢測(cè)過程復(fù)雜，影響因素較多，即使室內(nèi)質(zhì)控在控，也可能因孔間差異而造成結(jié)果的差異，因此加大復(fù)查力度是保證結(jié)果準(zhǔn)確性的可靠方法，可疑、弱陽(yáng)性標(biāo)本及少見模式的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行復(fù)查。
“小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒”標(biāo)本收集：
1.收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原，無(wú)內(nèi)毒素試管�！ �
2.血漿抗凝劑推薦使用EDTA。避免使用溶血，高血脂標(biāo)本。
3.標(biāo)本應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除�！ �
4.標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次使用量分裝，凍存于-20℃，-70℃電冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融，3-6月內(nèi)檢測(cè)。
二、如何降低試劑盒背景的步驟
大家都知道Elisa背景太高，會(huì)導(dǎo)致試劑盒檢測(cè)失敗，那么背景過高，而您懷疑洗滌不夠時(shí)，根據(jù)我司多年經(jīng)驗(yàn)�？梢試L試增加洗滌次數(shù)。這種封鎖液便宜、不亂，在去除洗滌過程中的一些非特異結(jié)合上很有用。假如濃渡過高，或者未準(zhǔn)確稀釋，則會(huì)導(dǎo)致高背景。常用的蛋白封鎖液包括牛血清白蛋白（BSA）、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。封鎖液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛伏的結(jié)合位點(diǎn)。ELISA實(shí)驗(yàn)的原理好像很簡(jiǎn)樸，不過乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，間中夾雜著洗滌和封鎖。假如您的背景過高，懷疑封鎖不充分，那么您可以嘗試使用更高濃度的封鎖液，或適當(dāng)延長(zhǎng)封鎖時(shí)間。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截很多不同類型的分子相互作用。另一個(gè)選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封鎖液，后者可協(xié)助洗滌過程中的封鎖。解決這個(gè)題目的一種方法是使用雞或魚的正常血清。好的封鎖液應(yīng)降低非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，我們是否能獲得有意義的信息，這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。
假如您的ELISA不幸地碰到了高背景，那么也無(wú)需太擔(dān)心，依次查看ELISA系統(tǒng)中的組分，并排除可能存在的題目。記住，非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景。不外，它的缺點(diǎn)在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。為了防止這一點(diǎn)，切勿使用過多的一抗或二抗。請(qǐng)勿使用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%），它會(huì)降低特異結(jié)合，產(chǎn)生假陰性。這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì)。目前主要有兩種類型的封鎖液：蛋白和非離子型去污劑。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。假如您一直被背景題目所困擾，那么也許您該花些時(shí)間來(lái)優(yōu)化封鎖液。
三、“小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒”特點(diǎn)
1.一般有兩種金標(biāo)二抗，配Goat-anti-Rabbit和Goat-anti-Mouse抗體
2.精細(xì)純化并經(jīng)過預(yù)吸附的抗體
3.同rabbit 和mouse的單抗和多抗一起使用
4.很低的背景
5.電鏡級(jí)別，非常適于電鏡下的單標(biāo)或者雙標(biāo)
計(jì)算：以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
四、實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備
1.要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使結(jié)果更穩(wěn)定。
2. “小鼠β半乳糖苷酶(βGAL)ELISA試劑盒”實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光保存。
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