產(chǎn)品展示
小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒
點擊次數(shù):72發(fā)布時間:2015/3/12 20:48:28

更新日期:2019/4/3 17:18:53
所 在 地:美洲
產(chǎn)品型號:
品牌名稱:R&D
優(yōu)質(zhì)供應
詳細內(nèi)容
ELISA手工檢測過程復雜,影響因素較多,即使室內(nèi)質(zhì)控在控,也可能因孔間差異而造成結果的差異,因此加大復查力度是保證結果準確性的可靠方法,可疑、弱陽性標本及少見模式的檢測結果進行復查。
“小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒”標本收集:
1.收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管!
2.血漿抗凝劑推薦使用EDTA。避免使用溶血,高血脂標本。
3.標本應清澈透明,懸浮物應離心去除!
4.標本收集后若不及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃,-70℃電冰箱內(nèi),避免反復凍融,3-6月內(nèi)檢測。
二、如何降低試劑盒背景的步驟
大家都知道Elisa背景太高,會導致試劑盒檢測失敗,那么背景過高,而您懷疑洗滌不夠時,根據(jù)我司多年經(jīng)驗。可以嘗試增加洗滌次數(shù)。這種封鎖液便宜、不亂,在去除洗滌過程中的一些非特異結合上很有用。假如濃渡過高,或者未準確稀釋,則會導致高背景。常用的蛋白封鎖液包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。封鎖液的作用是讓不相關的蛋白占據(jù)微孔板中潛伏的結合位點。ELISA實驗的原理好像很簡樸,不過乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗滌和封鎖。假如您的背景過高,懷疑封鎖不充分,那么您可以嘗試使用更高濃度的封鎖液,或適當延長封鎖時間。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截很多不同類型的分子相互作用。另一個選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封鎖液,后者可協(xié)助洗滌過程中的封鎖。解決這個題目的一種方法是使用雞或魚的正常血清。好的封鎖液應降低非特異性結合,但它不應當與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。在實驗結束時,我們是否能獲得有意義的信息,這在很大程度上取決于結果的信噪比。
假如您的ELISA不幸地碰到了高背景,那么也無需太擔心,依次查看ELISA系統(tǒng)中的組分,并排除可能存在的題目。記住,非特異的抗體結合會增加背景。不外,它的缺點在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。為了防止這一點,切勿使用過多的一抗或二抗。請勿使用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%),它會降低特異結合,產(chǎn)生假陰性。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結合的機會。目前主要有兩種類型的封鎖液:蛋白和非離子型去污劑。您當然也希望抗體只與目的蛋白結合吧。假如您一直被背景題目所困擾,那么也許您該花些時間來優(yōu)化封鎖液。
三、“小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒”特點
1.一般有兩種金標二抗,配Goat-anti-Rabbit和Goat-anti-Mouse抗體
2.精細純化并經(jīng)過預吸附的抗體
3.同rabbit 和mouse的單抗和多抗一起使用
4.很低的背景
5.電鏡級別,非常適于電鏡下的單標或者雙標
計算:以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
四、實驗前的準備
1.要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩(wěn)定。
2. “小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒”實驗時,要使底物避光保存。
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