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各種類型ELISA測定時一般需經過這些步驟：固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結果。
1.重復某一樣品時，加樣時間盡可能與次接近。
2.加樣后在混勻器上充分混勻。
二、ELISA常用的幾種方法
1、雙抗體夾心法測定抗原
將抗原免疫種動物獲得的抗體吸附于固相表面;
加抗原，形成抗原-抗體復合物;
加抗原免疫第二種動物獲得的抗體，形成抗體抗原抗體復合物;
加酶標抗抗體(第二種動物抗體的抗體);
加底物。底物的降解量＝抗原量。
2、直接法測定抗原
將抗原吸附在載體表面；
加酶標抗體，形成抗原—抗體復合物；
加底物。底物的降解量＝抗原量。
3、間接法測定抗體
將抗原吸附于固相載體表面；
加抗體, 形成抗原-抗體復合物；
加酶標抗體；
加底物。 測定底物的降解量＝抗體量。
三、注意事項
1.操作“人低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒”時必須戴手套，穿工作衣，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。
2.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
3.樣品稀釋液應用加液器加注，并經常校對其準確性。
四、ELISA操作技巧
1.合理安排檢測量，以免反應板過多造成洗板等待時間長。
2.顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
3.加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產生氣泡。
4.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
五、ELISA方法特點
1.基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達，表達產物包含更多的抗原決定簇，可提高試劑盒的靈敏度，提高檢出率。
2.分子量大：合成肽采用化學方法制備，由于工藝的局限，合成數(shù)量有限，只能達到數(shù)百個氨基酸。而利用基因工程制備的抗原，分子量更大。
如果您購買了“人低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒”之后沒時間做實驗，我公司可以安排專業(yè)的技術人員為您進行免費代檢測。
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