產(chǎn)品展示
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
各種類(lèi)型ELISA測(cè)定時(shí)一般需經(jīng)過(guò)這些步驟：固相包被→加待測(cè)樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。
1.重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與次接近。
2.加樣后在混勻器上充分混勻。
二、ELISA常用的幾種方法
1、雙抗體夾心法測(cè)定抗原
將抗原免疫種動(dòng)物獲得的抗體吸附于固相表面;
加抗原，形成抗原-抗體復(fù)合物;
加抗原免疫第二種動(dòng)物獲得的抗體，形成抗體抗原抗體復(fù)合物;
加酶標(biāo)抗抗體(第二種動(dòng)物抗體的抗體);
加底物。底物的降解量＝抗原量。
2、直接法測(cè)定抗原
將抗原吸附在載體表面；
加酶標(biāo)抗體，形成抗原—抗體復(fù)合物；
加底物。底物的降解量＝抗原量。
3、間接法測(cè)定抗體
將抗原吸附于固相載體表面；
加抗體, 形成抗原-抗體復(fù)合物；
加酶標(biāo)抗體；
加底物。 測(cè)定底物的降解量＝抗體量。
三、注意事項(xiàng)
1.操作“人精氨酸酶(Arg)ELISA試劑盒”時(shí)必須戴手套，穿工作衣，嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。
2.試驗(yàn)結(jié)果的判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
3.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。
四、ELISA操作技巧
1.合理安排檢測(cè)量，以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
2.顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
3.加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
4.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
五、ELISA方法特點(diǎn)
1.基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物包含更多的抗原決定簇，可提高試劑盒的靈敏度，提高檢出率。
2.分子量大：合成肽采用化學(xué)方法制備，由于工藝的局限，合成數(shù)量有限，只能達(dá)到數(shù)百個(gè)氨基酸。而利用基因工程制備的抗原，分子量更大。
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