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優(yōu)質供應
詳細內容
【產品規(guī)格】:96T 48T
【產品品牌】:R&D TSZ
【保存溫度】:短期4℃/長期-20℃保存
【保 質 期】:六個月
【產品用途】:科研實驗等領域科學研究,不得用于臨床診斷。
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等等。
ELISA操作步驟復雜,影響反應因素較多,特別是固相載體的包被難達到各個體之間的一致,因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參考標準品在相同的條件下制作標準曲線。測定大分子量物質的夾心法ELISA,標準曲線的范圍一般較寬,曲線的值逐點連接,所得曲線一般呈S形,其頭、尾部曲線趨于平坦,中央較呈直線的部分是*理想的檢測區(qū)域。
一、標本的采取和保存
體液、分泌物和排泄物等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。
標本以血清標本為例:血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份同血清。血漿和血清可同等應用。
血清標本應避免溶血:紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質,以HRP為標記的ELISA測定中,可能會增加非特異性顯色。
在“人磷酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒”實驗中3次加樣步聚,即加標本,加酶結合物,加底物。加樣時應將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產生氣泡。
二、ELISA洗滌
目的:達到分離游離的和結合的酶標記物。
清除殘留在板孔中游離的物質,以及非特異性地吸附的干擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,而在洗滌時又應把這種非特異性吸附的干擾物質洗滌下來。
可以說在ELISA操作中,洗滌是*主要的關鍵技術。洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有流水沖洗式和浸泡式兩種:
1.流水沖洗式:流水沖洗法*初用于小珠載體的洗滌,洗滌液為蒸餾水,自來水。洗滌效果更為徹底,且也簡便、快速。已有實驗表明,流水沖洗式同樣適用于微量滴定板的洗滌。讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。
2.浸泡式:微量滴定板多采用。洗滌液為非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質的結合是疏水性的,非離子型洗滌劑既含疏水基團,也含親水基團,使蛋白質回復到水溶液狀態(tài),從而脫離固相載體。
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