產(chǎn)品展示
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
【產(chǎn)品規(guī)格】:96T 48T
【產(chǎn)品品牌】:R&D TSZ
【保存溫度】:短期4℃/長期-20℃保存
【保 質(zhì) 期】:六個(gè)月
【產(chǎn)品用途】:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究,不得用于臨床診斷。
【待檢樣本】:體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等。
ELISA操作步驟復(fù)雜,影響反應(yīng)因素較多,特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的一致,因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬,曲線的值逐點(diǎn)連接,所得曲線一般呈S形,其頭、尾部曲線趨于平坦,中央較呈直線的部分是*理想的檢測區(qū)域。
一、標(biāo)本的采取和保存
體液、分泌物和排泄物等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。
標(biāo)本以血清標(biāo)本為例:血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份同血清。血漿和血清可同等應(yīng)用。
血清標(biāo)本應(yīng)避免溶血:紅細(xì)胞溶解時(shí)會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,可能會增加非特異性顯色。
在“人肌球蛋白輕鏈激酶(MLCK)ELISA試劑盒”實(shí)驗(yàn)中3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。
二、ELISA洗滌
目的:達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物。
清除殘留在板孔中游離的物質(zhì),以及非特異性地吸附的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。
可以說在ELISA操作中,洗滌是*主要的關(guān)鍵技術(shù)。洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有流水沖洗式和浸泡式兩種:
1.流水沖洗式:流水沖洗法*初用于小珠載體的洗滌,洗滌液為蒸餾水,自來水。洗滌效果更為徹底,且也簡便、快速。已有實(shí)驗(yàn)表明,流水沖洗式同樣適用于微量滴定板的洗滌。讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。
2.浸泡式:微量滴定板多采用。洗滌液為非離子型洗滌劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的,非離子型洗滌劑既含疏水基團(tuán),也含親水基團(tuán),使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀態(tài),從而脫離固相載體。
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