產(chǎn)品展示
人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒
點(diǎn)擊次數(shù)：48發(fā)布時(shí)間：2015/3/3 11:18:56
更新日期：2019/2/20 13:40:28
所 在 地：美洲
產(chǎn)品型號(hào)：
品牌名稱：R&D
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測(cè)范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測(cè)試劑盒，有效控制檢測(cè)試劑成本。并可提供免費(fèi)代測(cè)。
二、如何降低試劑盒背景的步驟
大家都知道Elisa背景太高，會(huì)導(dǎo)致試劑盒檢測(cè)失敗，那么背景過高，而您懷疑洗滌不夠時(shí)，根據(jù)我司多年經(jīng)驗(yàn)�？梢試L試增加洗滌次數(shù)。這種封鎖液便宜、不亂，在去除洗滌過程中的一些非特異結(jié)合上很有用。假如濃渡過高，或者未準(zhǔn)確稀釋，則會(huì)導(dǎo)致高背景。常用的蛋白封鎖液包括牛血清白蛋白（BSA）、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。封鎖液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛伏的結(jié)合位點(diǎn)。ELISA實(shí)驗(yàn)的原理好像很簡(jiǎn)樸，不過乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，間中夾雜著洗滌和封鎖。假如您的背景過高，懷疑封鎖不充分，那么您可以嘗試使用更高濃度的封鎖液，或適當(dāng)延長(zhǎng)封鎖時(shí)間。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截很多不同類型的分子相互作用。另一個(gè)選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封鎖液，后者可協(xié)助洗滌過程中的封鎖。解決這個(gè)題目的一種方法是使用雞或魚的正常血清。好的封鎖液應(yīng)降低非特異性結(jié)合，但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，我們是否能獲得有意義的信息，這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。
假如您的ELISA不幸地碰到了高背景，那么也無需太擔(dān)心，依次查看ELISA系統(tǒng)中的組分，并排除可能存在的題目。記住，非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景。不外，它的缺點(diǎn)在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。為了防止這一點(diǎn)，切勿使用過多的一抗或二抗。請(qǐng)勿使用高濃度（正常濃度為0.01-0.1%），它會(huì)降低特異結(jié)合，產(chǎn)生假陰性。這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì)。目前主要有兩種類型的封鎖液：蛋白和非離子型去污劑。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。假如您一直被背景題目所困擾，那么也許您該花些時(shí)間來優(yōu)化封鎖液。
三、“人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒”技術(shù)流程
雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。
間接法(檢測(cè)未知抗體)
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,*后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。
四、購買“人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒”客戶須知
1、液體類標(biāo)本（細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等）；
2、樣本保存：請(qǐng)盡早檢測(cè)，2-8℃保存一天；需更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（-20℃或-70℃）保存。如需周期收集樣本，請(qǐng)將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號(hào)后，置-20℃或-70℃保存；
3、請(qǐng)?zhí)崆案嬖V我們：您樣本的種屬、樣本數(shù)量、待測(cè)指標(biāo)及其他特殊要求。
五、Elisa試劑盒報(bào)告內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)
1、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線；
2、詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟；
3、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（試劑耗材，實(shí)驗(yàn)方法，實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)果說明）；
4、實(shí)驗(yàn)進(jìn)行階段，我公司客服人員會(huì)及時(shí)向您匯報(bào)實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
六、“人抗淋巴細(xì)胞毒抗體(ALA/LCA)ELISA試劑盒”具備價(jià)廉質(zhì)保特色優(yōu)點(diǎn)
1.靈活運(yùn)用：我司試劑在目前市場(chǎng)上包含種屬、種類上千種。
2.降低成本：我公司實(shí)驗(yàn)室采進(jìn)口原料包備，價(jià)格實(shí)惠，能為您節(jié)省開支。
3.R&D 認(rèn)可：通過美國R&D公司認(rèn)可，榮獲代理權(quán)，質(zhì)量放心且保證。
4.另提供無成分試劑-試劑不含配方，不造成環(huán)境重金屬污染。
5.包裝精良：透明玻璃管附鐵氟龍旋蓋，直徑16mm，外盒為生物可分解材質(zhì)，具環(huán)保概念。
