產(chǎn)品展示
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
英文名稱:T4 DNA Ligase
CAS號(hào):9015-85-4
分子量:55.3kDa,單體
級(jí)別: BR
來源:含有T4噬菌體克隆基因30的大腸桿菌
濃度:30Weiss u/ul(6000CEU/ul)
活性定義:是指在ATP-PPi交換反應(yīng)中,37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol [32PPi]轉(zhuǎn)換為Norit可吸收形式所需的酶量(weiss單位,1個(gè)weiss單位相當(dāng)于約200個(gè)粘性末端連接單位。1個(gè)粘性末端連接單位:20ul反應(yīng)體系(50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 25ug/ml BSA, 12uM(300ug/ml)的5-DNA末端)中,在16℃、30分鐘內(nèi)連接50%連接HindIII酶切的Lambda DNA 產(chǎn)物所需的酶量)
酶活性分析混合物:66mM Tris-HCL(PH7.6), 10mM DTT, 6.6mM MgCL2, 0.066mM ATP, 3.3uM[32PPi]
保存液組分:20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA和50%(v/v)甘油
10×T4 DNA Ligase緩沖液(#B69):400mM Tris-HCL, 100mM MgCL2, 100mM DTT, 5mM ATP(PH7.5,25℃)
抑制劑:當(dāng)反應(yīng)體系中NaC1或KC1的濃度超過200 mM時(shí),可強(qiáng)烈抑制T4 DNA Ligase活性
失活:65℃加熱10分鐘或70℃加熱5分鐘
注意:T4 DNA Ligase與DNA結(jié)合會(huì)改變條帶的瓊脂糖凝膠電泳遷移率,為避免此現(xiàn)象,電泳前需處理樣本或分子量標(biāo)準(zhǔn)。樣本處理如下:樣本與Fermentas公司6×DNA Loading Dye&SDS溶液(#R1151)混合,75℃加熱5分鐘或65℃加熱10分鐘后冰浴保存;轉(zhuǎn)化時(shí),連接產(chǎn)物的體積不得超過感受態(tài)細(xì)胞體積中的10%;電轉(zhuǎn)化之前,先用lvfang抽提方法除去連接混合物中的T4 DNA Ligase,然后經(jīng)乙醇沉淀純化抽提產(chǎn)物
質(zhì)量控制:測(cè)試表明無內(nèi)切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染。功能檢測(cè):粘性末端或平末端DNA的連接能力
性狀:液體。該酶催化雙鏈DNA或RNA中毗鄰的5'磷酸基團(tuán)和3'-羥基末端之間形成磷酸二酯鍵,還可以修復(fù)雙鏈DNA、RNA或DNA/RNA復(fù)合體中的單鏈切口,連接DNA的粘性和平末端,但該酶對(duì)單鏈核酸無酶活性。該酶需要輔因子ATP
用途:生化研究。粘性末端或平末端雙鏈DNA的連接;雙鏈寡核苷酸接頭與雙鏈DNA連接;雙鏈DNA、RNA或DNA-RNA復(fù)合體中缺口的修復(fù);連接酶介導(dǎo)的RNA檢測(cè);位點(diǎn)特異性突變;擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性
保存: -20°C
IUPAC對(duì)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的分類為:
A級(jí):原子量標(biāo)準(zhǔn)。
B級(jí):和A 級(jí)*接近的基準(zhǔn)物質(zhì)。
C級(jí):含量為100+-0.02%的標(biāo)準(zhǔn)試劑
D級(jí):含量為100+-0.05%的標(biāo)準(zhǔn)試劑
E級(jí):以C級(jí)或D級(jí)為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)比測(cè)定得到的純度的試劑
化學(xué)試劑按用途可分為標(biāo)準(zhǔn)試劑,一般試劑,生化試劑等等。
我國習(xí)慣將相當(dāng)于IUPAC 的C級(jí)、D級(jí)的試劑稱為標(biāo)準(zhǔn)試劑。
“T4 DNA連接酶”訂購優(yōu)勢(shì):
全:公司提供上萬種產(chǎn)品,涵蓋了生物試劑,elisa試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品,培養(yǎng)基,原裝耗材,抗體、培養(yǎng)基、ATCC細(xì)胞等,基本上各種科研所需產(chǎn)品在我司都能找到。
新:產(chǎn)品更新速度較快,基本上每周都有新產(chǎn)品出現(xiàn)。
優(yōu):產(chǎn)品質(zhì)量好,投訴比較少。
品:公司長(zhǎng)期代理sigma,amresco,oxoid,wako,R&D,TCI,GIBIO,等國內(nèi)外知名品牌。
好:我公司具有優(yōu)質(zhì)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),產(chǎn)品一旦售出,實(shí)驗(yàn)過程中遇到困難可提供在線技術(shù)咨詢。使您使用產(chǎn)品時(shí)沒有任何的后顧之憂。
儲(chǔ)存條件:
避光、干燥陰涼處封閉貯存,嚴(yán)禁與有毒、有害物品混放、混運(yùn)。本品為非危險(xiǎn) 產(chǎn)品可按一般化學(xué)品運(yùn)輸,輕搬動(dòng)輕放,防止日曬、雨淋!受熱、受潮、受光后易喪失活力,保存期短,因此貯存和運(yùn)輸條件比較苛刻。
“T4 DNA連接酶”使用注意事項(xiàng):
1、雖然本試劑在有效期過后很長(zhǎng)一段時(shí)間仍可以使用,但還是強(qiáng)烈建議您在管體規(guī)定的有效期內(nèi)正確使用。
2、請(qǐng)不要在臟亂和強(qiáng)光環(huán)境中取用,以免造成污染和失效。
3、如果一次使用很少可以將其適當(dāng)分裝后使用,這樣可以有效的防止試劑污染。
公司年末熱銷產(chǎn)品:
品名
D-亮氨醇/(R)-2-氨基-4-甲基-1-戊醇/(R)-(?)-Leucinol
BOC-L-天冬酰胺/N-叔丁氧羰基-L-天冬酰胺/BOC-L-天門冬酰胺/N-BOC-L-天冬酰氨酸/Boc-L-asparagine
BOC-D-天冬酰胺/N-叔丁氧羰基-D-天冬酰胺/BOC-D-天門冬酰胺/Boc-D-asparagine
BOC-L-天冬氨酸/ N-叔丁氧羰基-L-天冬氨酸/BOC-L-天門冬氨酸/Boc-Asp-OH
BOC-D-天冬氨酸/N-叔丁氧羰基-D-天冬氨酸/BOC-D-天門冬氨酸/Boc-D-Asp-OH