在高效液相色譜中梯度洗脫裝置的作用是什么
在氣相色譜中,為了改善對(duì)寬沸程樣品的分離和縮短分析周期,廣泛采用程序升溫的方法。而在液相色譜中對(duì)組分復(fù)雜的樣品則采用梯度洗脫的方法。在同一個(gè)分析周期中,按一定程序不斷改變流動(dòng)相的濃度配比,稱為梯度洗脫。從而可以使一個(gè)復(fù)雜樣品中的性質(zhì)差異較大的組分能按各自適宜的容量因子k達(dá)到良好的分離目的。
在高效液相色譜中梯度洗脫裝置的作用是什么?梯度洗脫裝置分兩種:
1.高壓梯度:用兩臺(tái)高壓輸液泵將兩種溶劑輸入
2.低壓梯度:在常壓下將兩種溶劑(或多元溶劑)混合,然后用高壓輸液泵將流動(dòng)相輸入到色譜柱中。
梯度洗脫可提高分離度、縮短分離時(shí)間、降低*小檢測(cè)量和提高分離精度。但在使用中,梯度洗脫也有許多與等度洗脫不同的地方需要注意。
梯度洗脫時(shí)應(yīng)注意:
1、注意各溶劑間的互溶性。
2、對(duì)溶劑的純度要求更高(影響重現(xiàn)性)。
3、注意梯度變化時(shí)系統(tǒng)壓力的變化,防止超出限度。
4、梯度結(jié)束后,用初始流動(dòng)相沖洗,使柱子平衡一段時(shí)間(再生),使系統(tǒng)回復(fù)到初始狀態(tài)。(梯度周期)
5、低壓梯度要注意脫氣,混合后容易產(chǎn)生氣泡。
6、容易出現(xiàn)鬼峰,應(yīng)作空白試驗(yàn)。
7、梯度選擇時(shí)盡量幾相之間相變化要小,否則不易平衡。
8、梯度洗脫應(yīng)使用對(duì)流動(dòng)相組成變化不敏感的選擇性檢測(cè)器(如紫外吸收檢測(cè)器或熒光檢測(cè)器),而不能使用對(duì)流動(dòng)相組成變化敏感的通用型檢測(cè)器(如示差折光檢測(cè)器)。
9、要注意水相中鹽的濃度,防止在有機(jī)相提升過程中鹽的析出。
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