因此，關(guān)于溫育，在實(shí)際測定操作中一定要注意以下幾點(diǎn)：

（1）要保證在設(shè)定的溫度下有足夠的反應(yīng)時(shí)間。一般來說，加完樣本和/或反應(yīng)試劑后，將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時(shí)，孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃，需要一定的時(shí)間，尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)下，這段升溫時(shí)間可能還比較長，而在臨床實(shí)驗(yàn)室中，很少有人注意這個(gè)問題，通常是將微孔板一放入溫箱即開始計(jì)時(shí)，這樣就很容易造成實(shí)際測定中溫育時(shí)間不夠，弱陽性樣本測不出來的問題。曾有一地處南方的血站同行提出了一個(gè)問題，就是在每一年的冬季總有那么一個(gè)多月的時(shí)間，在做HBsAg測定的室內(nèi)質(zhì)控中，測定由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心供應(yīng)的1 ng/ml弱陽性樣本時(shí)，總是測不出來，不知原因?yàn)楹�？這可能就與南方冬天室內(nèi)溫度較低有關(guān)，此時(shí)微孔板轉(zhuǎn)入溫箱后37℃溫育時(shí)間不夠，以致弱陽性樣本測定為陰性。因此，為保證37℃下足夠的溫育時(shí)間，臨床實(shí)驗(yàn)室可自行確定本實(shí)驗(yàn)室不同季節(jié)（不同室溫下）微孔板從室溫拿至溫箱后需要多長時(shí)間孔內(nèi)溫度才能達(dá)到37℃，從而適當(dāng)延長板條在溫箱中的放置時(shí)間。具體的做法是，用一小溫度計(jì)放置板孔反應(yīng)溶液中測量觀察即可。

（2）溫育溫度的選擇。在人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3αELISA試劑盒等elisa試劑盒的說明書中，指出溫育溫度可有兩種，例如，一種是37℃下1小時(shí)，另一種則為43℃下45分鐘。從免疫測定的抗原抗體反應(yīng)的本質(zhì)來看，在較低的溫度下反應(yīng)較長的時(shí)間*為完全。如2～8℃下反應(yīng)24小時(shí)。較高的反應(yīng)溫度，由于分子運(yùn)動(dòng)的加憐惜，反應(yīng)時(shí)間縮短，這一點(diǎn)對分子含量較多的強(qiáng)陽性樣本的測定沒有問題，但對分子含量少的弱陽性樣本則有漏檢的可能。因此，我們建議在臨床ELISA測定中盡量使用較低溫育溫度較長反應(yīng)時(shí)間的條件。

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