【目的】
掌握顯微鏡的操作規(guī)程；了解光學顯微鏡的結(jié)構及原理；了解顯微鏡的保養(yǎng)方法。掌握臨時水封片的制作。
【用品】
顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、吸管、吸水紙。
【材料】
松（Pinus）莖橫切永久制片、含綠藻的水、寫有“上”字的小紙片。
【內(nèi)容及方法】
一、顯微鏡的結(jié)構
光學顯微鏡（以下簡稱為顯微鏡），是用來觀察肉眼看不見的微小生物結(jié)構的。雖然電子顯微鏡已經(jīng)問世，但是，在目前一般的科學研究和教學中，顯微鏡仍然是重要的、較為精密的生物觀察儀器。為了正確操作、妥善保管和維護顯微鏡，使之延長使用年限，作為生物學工作者，必須了解顯微鏡的結(jié)構和功能。

圖1.顯微鏡的結(jié)構

Motic B1-220ASC 型顯微鏡外形結(jié)構圖
一架顯微鏡包括光學系統(tǒng)和機械裝置兩大部分（見圖）
（一）機械部分
1．鏡筒是一個金屬長筒，筒口上端安裝目鏡鏡頭，下端裝有鏡頭轉(zhuǎn)換器和物鏡鏡頭。
2．鏡頭轉(zhuǎn)換器是安裝在鏡簡下端的一個旋轉(zhuǎn)圓盤。鏡頭轉(zhuǎn)換器上有3－－5 個孔，分別裝有低倍或高倍物鏡鏡頭。
3．粗準焦螺旋位于鏡臂的下方，可以轉(zhuǎn)動，以便使載物臺能上下移動，從而調(diào)節(jié)焦距。
4．細準焦螺旋位于粗準焦螺旋外方，它的移動范圍較粗準焦螺旋小，可以細調(diào)焦距。
5．鏡座位于鏡臂下方，用以穩(wěn)固和支持鏡身。
6.鏡臂上接鏡筒，下連載物臺，呈弓曲形。為顯微鏡上的手握之處。
7．載物臺是放置玻片的平臺。其中央具有通光孔，載物臺上有金屬夾片夾，是用來卡住載玻片的夾子，轉(zhuǎn)動左、右移動尺螺旋還可使切片在載物臺上移動。
（二）光學部分
1．目鏡是插在鏡筒頂部的鏡頭，是由一組透鏡組成的，它可以使物鏡成倍地分辨、放大物像，例如 5×、10×、15×和20×。
2．物鏡安裝在物鏡轉(zhuǎn)換器的孔上，也是由一組透鏡組成的，能夠把物體清晰地放大。物鏡上刻有放大倍數(shù)，例如 （4、10、25、
40、100×）等。顯微鏡的放大倍數(shù)是目鏡倍數(shù)乘以物鏡的倍數(shù)。
3．底光源位于底座上，開關位于底座側(cè)方。光線的強度可以調(diào)節(jié)。
4．在鏡柱前有一個聚光器調(diào)節(jié)螺旋，它可以使聚光器升降，用以調(diào)節(jié)光線的強弱，下降時明亮度降低，上升時明亮度加強。
5．虹彩光圈又稱可變光闌，由多數(shù)金屬片組成，在較高級顯微鏡上具有此裝置。使用時移動其把柄，可控制聚光器透鏡的通光范圍，用以調(diào)節(jié)光的強度。虹彩光圈下常附有金屬圈，其上裝有濾
光片，可調(diào)節(jié)光源的色調(diào)。
二、顯微鏡的使用規(guī)程
（一）實驗時要把顯微鏡放在桌面上，鏡座應距桌沿6～7 cm左右，打開底光源開關。
（二）轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器，使低倍鏡頭正對載物臺上的通光孔。然后用雙眼注視目鏡內(nèi)，調(diào)整光源強度，把聚光鏡上升，把虹彩光圈調(diào)至，使光線反射到鏡簡內(nèi)，這時視野內(nèi)呈明亮的狀態(tài)。
（三）將所要觀察的裝片放在載物臺上，使被觀察的部分位于通光孔的正中央。
（四）先用低倍鏡觀察（物鏡 10×、目鏡 10×）。觀察之前，先轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋，使載物臺上升，使物鏡逐漸接近切片。需要注意，不能使物鏡觸及玻片，以防鏡頭將玻片壓碎。并轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋，使載物臺慢慢下降，不久即可看到玻片中材料的放大物像。
（五）如果在視野內(nèi)看到的物像不符合實驗要求（物像偏離視野），可慢慢移動左右移動尺。移動時應注意玻片移動的方向與視野中看到的物像移動的方向正好相反。如果物像不甚清晰，可以調(diào)節(jié)細準焦螺旋，直至物像清晰為止。
（六）如果進一步使用高倍物鏡觀察，應在轉(zhuǎn)換高倍物鏡之前，把物像中需要放大觀察的部分移至視野中央（將低倍物鏡轉(zhuǎn)換成高倍物鏡觀察時，視野中的物像范圍縮小了很多）。一般具有正常功能的顯微鏡，低倍物鏡和高倍物鏡基本齊焦，在用低倍物鏡觀察清晰時，換高信物鏡應該可以見到物像，但物像不一定很清晰，可以轉(zhuǎn)動細準焦螺旋進行調(diào)節(jié)。

（七）在轉(zhuǎn)換高倍物鏡并且看清物像之后，可以根據(jù)需要調(diào)節(jié)光圈或聚光器，使光線符合要求（一般將低倍物鏡換成高倍物鏡觀察時，視野要稍變暗一些，所以需要調(diào)節(jié)光線強弱）。
（八）觀察完畢，應先將物鏡鏡頭從通光孔處移開，然后將
顯微鏡復原。并檢查零件有無損傷（特別要注意檢查物鏡是否沾水，如沾了水要用鏡頭紙擦凈），檢查處理完畢后即可放回原處。
三、顯微鏡的維護
1.必須熟練掌握并嚴格執(zhí)行使用規(guī)程。
2.取送顯微鏡時一定要一手握住鏡臂，另一手托住底座。顯微鏡不能傾斜，以免目鏡從鏡筒上端滑出。取送顯微鏡時要輕拿輕放。
3.觀察時，不能隨便移動顯微鏡的位置。
4.凡是顯微鏡的光學部分，只能用特殊的擦鏡頭紙擦拭，不能亂用他物擦拭，更不能用手指觸摸透鏡，以免汗液玷污透鏡。
5.保持顯微鏡的清潔，避免灰塵、水及化學試劑的玷污。
6.轉(zhuǎn)換物鏡鏡頭時，不要搬動物鏡鏡頭，應轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器。
7.切勿隨意轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋。使用細準焦螺旋時，用力要輕，轉(zhuǎn)動要慢，轉(zhuǎn)不動時不要硬轉(zhuǎn)。
8.不得任意拆卸顯微鏡上的零件，嚴禁隨意拆卸物鏡鏡頭，以免損傷轉(zhuǎn)換器螺口，或螺口松動后使低高倍物鏡轉(zhuǎn)換時不齊焦。
9.在使用高倍物鏡時，不要用粗準焦螺旋調(diào)節(jié)焦距，以免移動距離過大，損傷物鏡和玻片。
10.保持顯微鏡的干燥。
11.用畢后，必須檢查物鏡鏡頭上是否沾有水或試劑，如有則要擦拭干凈，并且要把載物臺擦拭干凈，按規(guī)定放好。
四、顯微標本的觀察
1、取松莖橫切片做低倍及高倍鏡檢。
2、取寫有“上”字的紙片做低倍及高倍鏡檢。
3、用吸管吸取一滴含綠藻的水，滴一滴在干凈的載片上，加上蓋片，加蓋片的方法是蓋片一邊與載片接觸，然后慢慢蓋上，突然放下蓋片將會產(chǎn)生氣泡，影響觀察效果。然后置于顯微鏡下做低倍及高倍鏡檢。