醫(yī)學(xué)用,精子計(jì)數(shù)板
材料:優(yōu)質(zhì)玻璃無劃痕
可根據(jù)客戶要求制作各種規(guī)格的玻片.
應(yīng)用:手工血液學(xué)檢驗(yàn);紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板、嗜酸細(xì)胞計(jì)數(shù);精子分析;脊髓液/體液細(xì)胞計(jì)數(shù)。
精子的濃度可用血球計(jì)數(shù)板法進(jìn)行測(cè)定:輕輕搖動(dòng)精液,用微量移液器(取樣器)取精液100微升,擦去外部精液,加入一次性試管中,用移液管吸取3%氯化鈉溶液3.9毫升(即3900微升)加入精液中,混合均勻,原精液被稀釋了40倍。
 | 取樣稀釋原精液 |
將血球計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)上,加蓋蓋玻片,用取樣器吸取25微升稀釋后精液加入計(jì)數(shù)板與蓋玻片之間的計(jì)算室中使計(jì)算室充滿(見圖)。  |
將稀釋后的精液注入計(jì)數(shù)室中 |
放在顯微鏡下找到計(jì)算室,計(jì)數(shù)計(jì)算室內(nèi)的總精子數(shù),為了減少計(jì)數(shù)的工作量,可選擇有代表性的五個(gè)中方格,如四角一中心,或斜對(duì)角線的五個(gè)方格(見圖用紅色框標(biāo)記的中方格)計(jì)數(shù)精子。  |
計(jì)數(shù)室的五個(gè)中方格 |
為了避免計(jì)數(shù)精子時(shí)重復(fù),應(yīng)以精子的頭數(shù)為準(zhǔn),對(duì)在格線上的精子,可依照數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右的原則,計(jì)數(shù)五個(gè)中方格中的總精子數(shù)。為計(jì)算室的一個(gè)中方格,在計(jì)數(shù)量,在右側(cè)線和下端上的精子(為了識(shí)別,標(biāo)記為白色)是不應(yīng)進(jìn)行計(jì)數(shù)的精子。  | 一個(gè)中方格的精子(白色為不計(jì)數(shù)精子) |
五個(gè)中方格總精子計(jì)數(shù)完后得出的結(jié)果,依下列公式進(jìn)行計(jì)算原精子密度(此公式已被簡(jiǎn)化):
精子密度(億個(gè)/毫升)=五個(gè)中方格總精子數(shù)×0.02
血球計(jì)數(shù)板法是其它光學(xué)測(cè)定方法的基礎(chǔ),因?yàn)楣鈱W(xué)的度數(shù)是根據(jù)光學(xué)儀器的原理得出的,與精子密度并沒有直接關(guān)系,必須有已知的密度值才能獲得對(duì)照表。

活力是精液中前進(jìn)運(yùn)動(dòng)的精子所占總精子數(shù)的百分比。
對(duì)精子活力評(píng)定,通常只能作估測(cè),所以需要有一定經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員進(jìn)行評(píng)定。顯微鏡的恒溫載物臺(tái)應(yīng)在活力檢查前預(yù)熱到37~39℃,并把血球計(jì)數(shù)板(或者載玻片)、蓋玻片一起預(yù)熱。用移液器取10或15ul精液(注意移液器的吸嘴是一次性的,并用消毒紙巾擦凈,再取樣,以防污染精液),注在預(yù)熱后的血球計(jì)數(shù)板(或者載玻片)中間。并蓋上蓋玻片。蓋蓋玻片的方法是,先將蓋玻片放在精液滴的左側(cè)與載玻片形成一個(gè)角度,呈一個(gè)銳角,并向右移動(dòng)蓋玻片,蓋玻片與精液接觸時(shí),再將蓋玻片放下,這樣可避免產(chǎn)生氣泡,影響檢查結(jié)果。蓋上蓋玻片可以在顯微鏡視野里看到一薄層的精子,視野清晰,避免因不同層精子的活力不同而使判斷出現(xiàn)人為誤差。
用640倍或1600倍的顯微鏡來檢測(cè)精子的活力,即判斷視野中前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子所占的比例。
活力5級(jí)評(píng)分方法是:
整個(gè)視野中有明顯的大的運(yùn)動(dòng)波 很好 5分
出現(xiàn)一些運(yùn)動(dòng)波和精子成群運(yùn)動(dòng) 好 4分
出現(xiàn)成群運(yùn)動(dòng) 較好 3分
無成群運(yùn)動(dòng),部分呈前進(jìn)運(yùn)動(dòng) 一般 2分
只有蠕動(dòng) 差 1分
無精子活動(dòng) 0分
注:運(yùn)動(dòng)波是指精子成群運(yùn)動(dòng)時(shí),推動(dòng)液體運(yùn)動(dòng)形成的云霧狀翻滾現(xiàn)象。
對(duì)稀釋保存的精液,在進(jìn)行精子活力評(píng)估時(shí),一般采用十級(jí)制評(píng)分。即估測(cè)視野中前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子的百分率,因?yàn),稀釋后的精液,精子的運(yùn)動(dòng)較容易看清,可根據(jù)前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子和非前進(jìn)運(yùn)動(dòng)精子的大致比例,來進(jìn)行估計(jì)。例如,有70%的精子呈前進(jìn)運(yùn)動(dòng),則活力為0.7,以此類推。