故障

可能原因

解決方法

（一） 保留時(shí)間變化

1 柱溫變化

柱恒溫，必要時(shí)需配置恒溫箱

2 等度與梯度間未能充分平衡

至少用10倍柱體積的流動(dòng)相平衡柱

3 緩沖液容量不夠

用>25mmol/L的緩沖液

4 柱污染

每天沖洗柱

5 柱內(nèi)條件變化

穩(wěn)定進(jìn)樣條件，調(diào)節(jié)流動(dòng)相

6 柱快達(dá)到壽命

采用保護(hù)柱

（二） 保留時(shí)間縮短

1 流速增加

檢查泵，重新設(shè)定流速

2 樣品超載

降低樣品量

3 鍵合相流失

流動(dòng)相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向

4 流動(dòng)相組成變化

防止流動(dòng)相蒸發(fā)或沉淀

5 溫度增加

柱恒溫

（三） 保留時(shí)間延長(zhǎng)

1 流速下降

管路泄漏，更換泵密封圈，排除泵內(nèi)氣泡

2 硅膠柱上活性點(diǎn)變化

用流動(dòng)相改性劑，如加三乙胺，或采用堿至鈍化柱

3 鍵合相流失

同前（二）3

4 流動(dòng)相組成變化

同前（二）4

5 溫度降低

同前（二）5

（四） 出現(xiàn)肩峰或分叉

1 樣品體積過(guò)大

用流動(dòng)相配樣，總的樣品體積小于峰的15%

2 樣品溶劑過(guò)強(qiáng)

采用較弱的樣品溶劑

3 柱塌陷或形成短路通道

更換色譜柱，采用較弱腐蝕性條件

4 柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效

更換燒結(jié)不銹鋼，加在線(xiàn)過(guò)濾器，過(guò)濾樣品

5 進(jìn)樣器損壞

更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子

（五） 鬼峰

1.進(jìn)樣閥殘余峰

每次用后用強(qiáng)溶劑清洗閥，改進(jìn)閥和樣品的清洗

2.樣品中未知物

處理樣品

3.柱未平衡

重新平衡柱，用流動(dòng)相作樣品溶劑 （尤其是離子對(duì)色譜）

4.三氟乙酸（TFA）氧化（肽譜）

每天新配，用抗氧化劑

5.水污染（反相）

通過(guò)變化平衡時(shí)間檢查水質(zhì)量，用HPLC級(jí)的水

（六） 基線(xiàn)噪聲

1 氣泡（尖銳峰）

流動(dòng)相脫氣，加柱后背壓

2 污染（隨機(jī)噪聲）

清洗柱，凈化樣品，用HPLC級(jí)試劑

3 檢測(cè)器燈連續(xù)噪聲

更換氘燈

4 電干擾（偶然噪聲）

采用穩(wěn)壓電源，檢查干擾的來(lái)源（如水浴等）

5 檢測(cè)器中有氣泡

流動(dòng)相脫氣，加柱后背壓

（七） 峰拖尾

1 柱超載

降低樣品量，增加柱直徑采用較高容量的固定相

2 峰干擾

清潔樣品,調(diào)整流動(dòng)相

3 硅羥基作用

加三乙胺，用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度，降低流動(dòng)相PH值，鈍化樣品

4 同前（四）4

同前（四）4

5 同前（四）3

同前（四）3

6 死體積或柱外體積過(guò)大

連接點(diǎn)降至，對(duì)所有連接點(diǎn)作合適調(diào)整，盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接管

7 柱效下降

用較低腐蝕條件，更換柱，采用保護(hù)柱

（八） 峰展寬

1 進(jìn)樣體積過(guò)大

同（四）1

2 在進(jìn)樣閥中造成峰擴(kuò)展

進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴(kuò)散

3 數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢

設(shè)定速率應(yīng)使每峰大于10點(diǎn)

4 檢測(cè)器時(shí)間常數(shù)過(guò)大

設(shè)定時(shí)間常數(shù)為感興趣峰半寬的10%

5 流動(dòng)相粘度過(guò)高

增加柱溫，采用低粘度流動(dòng)相

6 檢測(cè)池體積過(guò)大

用小體積池，卸下熱交換器

7 保留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

等度洗脫時(shí)增加溶劑含量也可用梯度洗脫

8 柱外體積過(guò)大

將連接管徑和連接管長(zhǎng)度降至*小

9 樣品過(guò)載

進(jìn)小濃度小體積樣品