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離心機(jī)分離實(shí)例一
點(diǎn)擊次數(shù)：349 發(fā)布時(shí)間：2009/5/18 15:20:42
豬腎中微粒體膜組分粗品的分離
儀器與試劑
1.超速離心機(jī)（冷凍離心機(jī)）和轉(zhuǎn)頭
2.勻漿緩沖液。50m mol/L Hepes/NaOH （pH7.4），0.33mol/L蔗糖。
3.重懸緩沖液。10m mol/L Hepes/NaOH （pH7.4）。
方法
1.使用韋林?jǐn)嚢杵鳎ㄒ?℃預(yù)冷）在10倍體積（1L）的勻漿緩沖液（要求4℃預(yù)冷），中破碎100g豬腎皮質(zhì)。
2.將勻漿物在離心機(jī)中于8000×g離心15min；
3.小心地轉(zhuǎn)移出上清液，并將其在26000×g離心2min；
4.用重懸緩沖液（要求4℃預(yù)冷）重懸離心得到的微體沉淀至蛋白質(zhì)終濃度約為10mg/ml。這樣得到的微粒體沉淀重懸物就是膜結(jié)合蛋白質(zhì)的來(lái)源
原創(chuàng)作者：湘儀離心機(jī)儀器有限公司
