熒光定量PCR檢測技術(shù)從誕生到現(xiàn)在已經(jīng)有 8 年了，但是其應(yīng)用在近四年才迅猛增長。在 Medline 數(shù)據(jù)庫中，用“ Taqman” 或 ”real time PCR” 作為關(guān)鍵詞檢索，在1996 年僅有 19 篇，在 1997 年僅有 28 篇，在 98 、 99 、2000 年分別達到了 52 、 157 、 409 篇， 2003 年已經(jīng)達到2984 篇，相信在不久的將來會有更多的文章發(fā)表。針對實時 PCR 這一熱點領(lǐng)域，閃晶公司對它進行了深入細致的研究，并且及時地為廣大科研人員推出這項技術(shù)服務(wù)。

熒光定量PCR基本原理

•  Taqman 技術(shù)：該技術(shù)以美國 ABI 公司為代表。 PCR 擴增時，在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針。該探針為一直線型的寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個熒光報告基團和一個熒光淬滅基團，探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收， PCR 儀檢測不到熒光信號； PCR 擴增時（在延伸階段）， Taq 酶的 5'' － 3'' 外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條 DNA 鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與 PCR 產(chǎn)物形成完全同步，這也是定量的基礎(chǔ)所在。

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ABI公司
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Sybr green I熒光染料
熒光定量PCR Taq酶
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dUTP

原創(chuàng)作者：上海閃晶分子生物科技有限公司