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醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)離心技術(shù)功能需求
通用實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)可能會(huì)深入到每一個(gè)技術(shù)相關(guān)實(shí)驗(yàn)室.是一個(gè)潛在發(fā)展的市場(chǎng).應(yīng)當(dāng)引起裝備管理方面的高度重視。在明確實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)定位、主次技術(shù)需求及相應(yīng)離心方法的前提下,轉(zhuǎn)頭形式、rcf、rpm、樣品量等是選擇離心技術(shù)的基本參數(shù).要在此基礎(chǔ)上考慮離心機(jī)的選型、主要功能及兼顧功能的配置 2.1 醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)離心技術(shù)功能需求 2.1.1 RNA 離心制備 培養(yǎng)細(xì)胞經(jīng)低速離心f水平轉(zhuǎn)頭.300xg)完成細(xì)胞分離、裂解后。加RNA沉淀提取液,于4~C,10000~12000xgf角轉(zhuǎn)頭.微量1.5/2.0 ml Eppendorf管;≥15 ml、50 ml管)分步提取;組織樣本需先施勻漿預(yù)處理 2.1.2 DNA離心制備 水平轉(zhuǎn)頭.2 000xg左右(1.5/2.0 ml Eppendorf管。15 HIl、50 HIl錐底管或更大體積);再經(jīng)12000~27000xg。制備質(zhì)粒DNA:角轉(zhuǎn)頭,250 ml或500ml/瓶。5000~6000Xg;15~50 ml/管,12000~27000xg:4~C或特定溫度。 2.1.3 載體表達(dá)蛋白分離 角轉(zhuǎn)頭。250~500 ml/瓶,4000xg;15~50 ml錐底管,3000xg;角轉(zhuǎn)頭,5O Inl管/瓶,27000~g;4~C。 2.1.4 細(xì)胞純化和亞細(xì)胞器分離 用差速離心法分離細(xì)胞器和大小差別懸殊的細(xì)胞。由低速分步到高速離心.細(xì)胞器的沉降順序是細(xì)胞核、線粒體、溶酶體、過(guò)氧化酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、核蛋白體,所有過(guò)程控溫 2.1.5 細(xì)胞學(xué)涂片離心 除專(zhuān)用細(xì)胞涂片離心機(jī)外.在個(gè)別實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)上可配置細(xì)胞學(xué)涂片離心轉(zhuǎn)頭.實(shí)現(xiàn)一次1>4片離心。據(jù)細(xì)胞學(xué)特性,rcf控制在50~1000~g。選購(gòu)時(shí).需注意離心容器的樣品處理量是否滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/span> 2.1.6 離心超濾、濃縮、抽提 配合市售離心過(guò)濾濃縮管f1.5~8O ml,Coming,Millipore,Spectrum等)或樣品抽提容器使用。采用角轉(zhuǎn)頭或水平轉(zhuǎn)頭 角轉(zhuǎn)頭可使超濾膜與離心力不成直角而避免濃度極化:1000~12000xg不等.可參考所購(gòu)容器的使用說(shuō)明 2.1.7 微孔板離心 酶標(biāo)板、TC板、PCR板以及樣品抽提純化板的離心。在通用離心機(jī)可通過(guò)在大容量水平轉(zhuǎn)頭上配置微孔板吊架(rcf一般將低于轉(zhuǎn)頭的額定值1或選用微板專(zhuān)用離心轉(zhuǎn)頭實(shí)現(xiàn).1O00xg左右 每個(gè)吊架可放1~4塊標(biāo)準(zhǔn)96孑L板或更多,也有可兼做載玻片的離心適配器
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原創(chuàng)作者:凱達(dá)離心機(jī)世界