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血清的鑒別方法

血清是從血漿中去除纖維蛋白形成的非常復雜的混合物。雖然它的大部分成分是已知的，但有些成分仍不清楚，血清的組成和含量往往因供體動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件而異。雖然對血清的組成和作用進行了大量的研究，但仍存在一些問題。

1.血清中可能有數(shù)百種成分，但其確切的成分、含量及其作用機制仍不清楚，尤其是一些多肽生長因子、激素和脂質等尚未完全了解，給研究工作帶來諸多困難；

2.血清是批量生產(chǎn)的，批次之間差異很大，血清保存期一般一年。因此，保證每批血清的相似性其困難，限制了試驗的規(guī)范性和連續(xù)性；

3.不排除血清中含有揮發(fā)性物質，認為是“瓶內變質”的原因。

血清的規(guī)范使用與保存

血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含纖維蛋白原的膠狀液體,具有維持血液的正常粘度、酸堿度、滲透壓等作用。

血清的規(guī)范使用與保存：

需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.

　2、瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現(xiàn)沉淀.

　3、熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已完全解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量.補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學趨化和活化.

　4、一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內一起過濾,切勿直接過濾血清.

　5、血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清.

6、切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中的有效成分會破會而影響血清質量

注意事項

1、如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質量受損？

將血清從冷凍箱取出后，先置于2-8C冰箱使之溶解，然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是，溶解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻如何避免沉淀物的產(chǎn)生?解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20。C至37。C)，實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。

2、解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生

3、請勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質量。

4、保存方法

血清應保存在-5C至-2OC。然而，若存放于4C時，請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶，建議將無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇�容器內，再放回冷凍�?/span>