關鍵詞：Tris緩沖液 配置方法 應用

Tris中文品名為三羥甲基氨基甲烷； 氨基丁三醇；緩血酸胺；2-氨基-2-（羥甲基）-1,3-丙二醇。是一種白色結(jié)晶或粉末。溶于乙醇和水，微溶于乙酸乙酯、苯，不溶于乙MI，對銅、鋁有腐蝕作用，有刺激性的化學物質(zhì)。

Tris有很高的緩沖能力，在水中溶解度高，對很多酶反應是惰性的，使Tris成為用于許多生化目的非常滿意的緩沖液。一般用于穩(wěn)定反應體系的pH，在pH7.5-9.0之間有較強的緩沖能力。

Tris緩沖液的優(yōu)點：

① 因為Tris堿的堿性較強，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液；

② 對生物化學過程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。

Tris緩沖液的缺點：

① 緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大，緩沖液稀釋十倍，pH值的變化大于0.1；

② 溫度效應大，溫度變化對緩沖液pH值的影響很大，△pKa／℃＝－0.031，例如：4℃時緩沖液的pH＝8.4，則37℃時的pH＝7.4，所以一定要在使用溫度下進行配制，室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃～4℃；

③ 易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴密封；

④ 此緩沖液對某些pH電極發(fā)生一定的干擾作用，所以要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。

Tris緩沖液配置方法：

配制Tris-HCl緩沖液的方法有兩種：分別配制0.05 mol/L Tris和0.05 mol/L HCl溶液，然后按常用表中所列體積混合即可。但是由于標準濃度的稀鹽酸不易配制，所以常用另一種方法：以配置1 L 0.1 mol/L的Tris-HCl緩沖液為例：先稱12.11 g Tris堿溶于950 mL～970 mL 去離子水中，邊攪拌邊滴加4 N HCl，用pH計測定溶液pH值至所需的pH值，然后再加水補足到1 L。

Tris緩沖液pH范圍：

Tris緩沖液在生物化學研究中使用較廣泛的一種緩沖劑，它的常用有效pH范圍是在“中性”范圍，如：

Tris-HCl緩沖液：pH＝7.5～8.5

Tris-磷酸鹽緩沖液：pH＝5.0～9.0

Tris緩沖溶液的應用：

在電泳緩沖液中同甘氨酸構(gòu)成緩沖體系穩(wěn)定pH值；在凝膠中使用Tris-HCl緩沖體系穩(wěn)定pH值；被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑；Tris緩沖液的低離子強度特點還可用于線蟲的中間纖維的形成；在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”，可用于DNA的穩(wěn)定和存儲；將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成乙酸，獲得“TAE緩沖液”，換成硼酸可獲得TBE緩沖液。這兩種緩沖液常用于核酸電泳實驗中。