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生物緩沖劑Tris的能力及主要應(yīng)用
關(guān)鍵詞:Tris,Tris-HCl,生物緩沖劑
中文名稱:三羥甲基氨基甲烷
英文名稱:Tris;Tris(hydroxymethyl)aminomethane。
Tris是一種有機(jī)化合物,其分子式為C4H11NO3。它在水中溶解度高,對很多酶反應(yīng)是惰性的,具有很高的緩沖能力,并且對生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)過程的干擾很小,不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀,使得Tris成為非常優(yōu)秀的緩沖液制備材料。
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(Tris結(jié)構(gòu)式)
在室溫(25℃下),它的pKa為8.1。根據(jù)緩沖理論,tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0-9.2之間。0.1mol/l的水溶液pH為10.4。但其本身為弱堿,一般加入鹽酸以調(diào)節(jié)pH值,即可獲得所需pH值的緩沖液。其pH值隨溫度變化很大,一般來說溫度每升高1°C,pH 值下降 0.03 ,濃度每稀釋 10 倍,pH 降低 0.03-0.05 個單位。 精確應(yīng)用時應(yīng)使用帶有玻璃/甘汞復(fù)合電極,經(jīng)仔細(xì)校正的pH計(jì)。
主要應(yīng)用:
1. 1M Tris-HCl 6.8、1.5M Tris-HCl 8.8和是SDS-PAGE*常用的試劑,與生理體液的相容性好。
2. 在Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”,TE緩沖液被用于DNA的穩(wěn)定和儲存。將調(diào)節(jié)pH值的鹽酸換為乙酸即可以得到“TAE(Tris/Acetate/EDTA)緩沖液”,換成硼酸則獲得“TBE(Tris/Borate/EDTA)緩沖液”。TAE和TBE緩沖液常用于核酸電泳實(shí)驗(yàn)中。
3. Tris被用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長(作為蛋白緩沖液時,若后續(xù)工作需要質(zhì)譜,則不適宜用Tris)。Tris緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)可用于線蟲(C. elegans)核纖層蛋白(lamin)的中間纖維的形成。
4. 此外,Tris還是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些藥物的中間物,也被用作滴定標(biāo)準(zhǔn)物。
注意事項(xiàng):易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封;對某些pH電極有一定干擾作用,要使用與Tris溶液具有兼容性的電極。
德晟公司專業(yè)生產(chǎn)Tris、Tris-HCL、HEPES、CAPS、MOPS、PIPES等生物緩沖劑,在研發(fā)、生產(chǎn)和銷售的各個環(huán)節(jié)嚴(yán)格把關(guān),確保在優(yōu)秀的服務(wù)下滿足客戶需求。