產(chǎn)品展示
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
保質(zhì)期有效期:6個月
犬瘟熱病毒抗體(CDV-Ab)ELISA試劑盒@新聞推薦l
儲存方式保存條件:2-8℃
犬瘟熱病毒抗體(CDV-Ab)ELISA試劑盒@新聞推薦l
實驗原理
工作原理試劑盒采用間接法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被犬瘟熱病毒抗體(CDV-Ab)捕獲抗原的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、陰性和陽性對照,再加入HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的犬瘟熱病毒抗體(CDV-Ab)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),判定陰陽性。
犬瘟熱病毒抗體(CDV-Ab)ELISA試劑盒@新聞推薦l
標(biāo)本要求樣本處理及要求
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注:標(biāo)本溶血會影響*后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。
犬瘟熱病毒抗體(CDV-Ab)ELISA試劑盒@新聞推薦l
配件需要而未提供的試劑和器材
1. 酶標(biāo)儀(450nm)
2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
4. 蒸餾水或去離子水
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實驗結(jié)果計算
1. 陰性對照OD值:小于0.2。
2. 陽性對照OD值:大于0.8。
3、陽性判斷(Cut-Off值):陰性對照OD值+0.25,樣本OD值大于閾值,判定為陽性,反之,為陰性。
4、重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于15%。
5、儲藏:2-8℃避光密封保存。
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