企業(yè)檔案
- 會(huì)員類(lèi)型：免費(fèi)會(huì)員
- 工商認(rèn)證： 【已認(rèn)證】
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- 企業(yè)類(lèi)型：經(jīng)銷(xiāo)商
- 注冊(cè)資金：人民幣1000萬(wàn)
安捷倫1200系列
- 993967-902 Zorbax XDB-c18色譜柱
- G2170BA 32位 Chemstation液相色譜控制軟件
- G1314B 018 標(biāo)準(zhǔn)流通池
- G1314B 可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器
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waters高效液相色譜儀檢測(cè)人血漿中全反式維甲酸血藥含量
1實(shí)驗(yàn)所用的儀器設(shè)備
Waters高效液相色譜儀（515型恒流泵，486型紫外檢測(cè)器，Millennium32色譜工作站）；xw__80A旋渦混合器；3K18高速冷凍離心機(jī)；高速離心機(jī)。
2 色譜條件
色譜柱為Supelcosil LC-18DB柱（5 Ixm，4．6 mm×250 mm）；柱溫為室溫。流動(dòng)相 ：甲醇-水-冰乙酸（體積比82：17：1）；流速 1．5 mL·min 。檢測(cè)波長(zhǎng) 340 nm。
3 血藥濃度測(cè)定法
3.1 ATRA對(duì)照溶液配制 精密稱(chēng)取 ATRA對(duì)照品適量，以甲醇溶解并定容，制得濃度為 100 Ixg·mL的ATRA儲(chǔ)備液。將 ATRA儲(chǔ)備液以甲醇稀釋?zhuān)渲茲舛?/span> 分別 為 0．5、l、2．5、5、l0、25、50 g·mL 的ATRA對(duì)照溶液。
3.2 內(nèi)標(biāo)液配制 取內(nèi)標(biāo)阿維 A酸適量，置于 100mL量瓶中，以甲醇溶解并定容，制得濃度為7．5 g·mL 的內(nèi)標(biāo)液。
3.3 樣本處理 精密吸取血漿樣品l mL，置 10 mL具塞離心試管中，加入內(nèi)標(biāo)溶液 20 L，旋渦混合 30 S。加入 1 mol·L 的HC1溶液500 IxL，漩渦混合 30 S，再加入乙酸乙酯 3 mL，旋渦混合 1 min，4 500 r／min離心5 min。轉(zhuǎn)移上層液至尖底試管中，于 37 qC水浴中氮?dú)饬鞔蹈伞堅(jiān)尤肓鲃?dòng)相200 IxL漩渦混合30 s使溶解，l0 000 r／min離心 5 min，取上清液 50 進(jìn)樣，記錄色譜圖，以 ATRA峰面積（As）與內(nèi)標(biāo)峰面積（Ai）之比代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算 ATRA血藥濃度。
3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線 精密量取空白血漿 1 mL，置 10 mL具塞離心管中，分別加入不同濃度 ATRA對(duì)照溶液 20 L，混勻 ，使血藥濃度分別為 10、2O、50、100、200、500、 1000 ng·mL～。按樣本處理方法操作，以不 同濃度ATRA系列溶液的A 和 A 來(lái)計(jì)算A（A=A ／Ai），以A
值為縱坐標(biāo)，ATRA質(zhì)量濃度（P）為橫坐標(biāo)進(jìn)行直線回歸。
4 討 論
本文建立了一種靈敏、準(zhǔn)確的ATRA血藥濃度高效液相色譜測(cè)定法，適用于 APL病人 ATRA血藥濃度的常規(guī)監(jiān)測(cè)及臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究。通過(guò)監(jiān)測(cè) ATRA血藥濃度 ，可以更好地了解在某些 APL病人連續(xù)用藥治療中臨床復(fù)發(fā)及耐藥的原因。ATRA化學(xué)性質(zhì)活潑，見(jiàn)光易異構(gòu)化或氧化降解，因此在樣品提取過(guò)程中應(yīng)特別注意避光操作。提取過(guò)程中血漿加入 1 mol·L HC1溶液，使血漿酸化，可提高萃取 回收率 ，乙酸乙酯一步萃取可使萃取回收率達(dá)到80％以上。
