產(chǎn)品展示
小鼠超氧化物歧化酶ELISA試劑盒
點擊次數(shù)：0發(fā)布時間：2020/9/8 14:29:09
更新日期：2020/9/8 14:29:09
所 在 地：中國大陸
產(chǎn)品型號：
相關(guān)標(biāo)簽：小鼠超氧化物歧化酶ELISA試劑盒
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
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BIM網(wǎng)：http://www.servicebim.com
聯(lián)系電話：18221290082
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檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
保存：2-8℃聯(lián)系電話：021—60449724，13296089724
樣品形式：血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清/其它生物液體(具體情況請咨詢）
保存與運輸：短期4℃/長期-20℃保存
應(yīng)用范圍：科研用檢測試劑
小鼠超氧化物歧化酶ELISA試劑盒操作步驟：
1. 使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2. 根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育45分鐘。
4. 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。
6. 甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作4次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育5分鐘。避免光照。
8. 取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9. 在450nm波長處測定各孔的OD值。
Assay procedure
1.Dilute ａnd add sample:Dilute Original density Standard as follow table:
20μg/L5 Standard150μl Original density Standard+150μl Standard diluent
10μg/L4 Standard150μl 5 Standard+150μl Standard diluent
5μg/L3 Standard150μl 4 Standard+150μl Standard diluent
2.5μg/L2 Standard150μl 3 Standard +150μl Standard diluent
1.25μg/L1 Standard150μl 2 Standard +150μl Standard diluent
2.add sample：Set blank wells separately (blank comparison wells don’t add sample ａnd HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, ａnd Gently mix.
3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.
4.Configurate liquid: 30-fold wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water ａnd reserve.
5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.
6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except blank well.
7.incubate：Operation with 3.
8.washing：Operation with 5.
9.color：Add Chromogen Solution A 50ul ａnd Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃
10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).
