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勁馬文獻(xiàn):DAB 顯色試劑盒在文獻(xiàn)中的應(yīng)用

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上 傳 者:上海勁馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司

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丙泊酚長(zhǎng)期鎮(zhèn)靜對(duì)大鼠認(rèn)知功能及海馬 RAGE 表達(dá)的影響
王君艷 董濤 白栓成

【摘要】 目的 本研究擬觀察丙泊酚長(zhǎng)期鎮(zhèn)靜對(duì)大鼠認(rèn)知功能及海馬高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE)蛋白表達(dá)的影響及認(rèn)知功能改變與海馬 RAGE 蛋白表達(dá)有無關(guān)系,為臨床提供依據(jù)。方法 (1)選取成年雄性 Wistar 大鼠 12 只,隨機(jī)分為對(duì)照組、丙泊酚組。(2)丙泊酚組每天連續(xù)輸注 8 h,連續(xù)給藥 5 d,對(duì)照組給予生理鹽水。應(yīng)用 Morris 水迷宮對(duì)兩組大鼠開始連續(xù) 5 d 的行為學(xué)觀察,記錄逃逸潛伏期和空間探索時(shí)間。(3)大鼠末次水迷宮測(cè)試 1 h 后,取大鼠海馬,分別用 ELISA 法和免疫組織化學(xué)法測(cè)定 RAGE 蛋白的表達(dá)。結(jié)果 (1)定位航行試驗(yàn):①與對(duì)照組比較,丙泊酚組在第 1~4 天逃逸潛伏期延長(zhǎng)(P<0.05);②對(duì)照組 4 個(gè)時(shí)點(diǎn)的兩兩比較顯示:與第 1 天比較第 2、4 天逃逸潛伏期縮短(P<0.05)。丙泊酚組在 4 個(gè)時(shí)點(diǎn)的兩兩比較顯示:與第 1 天比較第 4 天逃逸潛伏期縮短(P<0.05)。(2)空間探索試驗(yàn):與對(duì)照組比較,丙泊酚組空間探索時(shí)間縮短,穿越平臺(tái)次數(shù)減少(P<0.05)。(3)海馬 RAGE 表達(dá):ELISA 法測(cè)定 RAGE蛋白結(jié)果,與對(duì)照組比較,丙泊酚組海馬 RAGE 蛋白表達(dá)上調(diào)(P<0.05);(4)免疫組化法測(cè)定 RAGE 蛋白結(jié)果:與對(duì)照組比較,異丙酚組海馬 CA1 區(qū) RAGE 免疫組化染色陽性細(xì)胞數(shù)增加。結(jié)論 丙泊酚長(zhǎng)期鎮(zhèn)靜可損害成年大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力,導(dǎo)致成年大鼠認(rèn)知功能降低,可能與其上調(diào)海馬 RAGE 表達(dá)有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】 二異丙酚; 催眠藥和鎮(zhèn)靜藥; 認(rèn)知障礙; 糖基化終產(chǎn)物,高級(jí)丙泊酚作為重癥患者臨床上應(yīng)用*為廣泛的鎮(zhèn)靜藥物,可能影響患者認(rèn)知功能。其臨床特點(diǎn)是起效迅速,無明顯蓄積,蘇醒快而完全。Pain 等[1]發(fā)現(xiàn)給大鼠腹腔注射低于鎮(zhèn)靜劑量的丙泊酚,結(jié)果發(fā)現(xiàn)大鼠的記憶能力仍受到損傷。因此本研究擬通過觀察丙泊酚不同給藥時(shí)間對(duì)成年大鼠行為學(xué)及腦內(nèi)高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE)表達(dá)影響,對(duì)鎮(zhèn)靜藥引起認(rèn)知功能損害機(jī)制進(jìn)行初步探討。

材料與方法
一、實(shí)驗(yàn)材料
1. 藥物與試劑:丙泊酚注射液(江蘇恩華藥業(yè)),兔抗大鼠 RAGE Elisa 試劑盒、大鼠 RAGE IHC 試劑盒(美國(guó) Santa Cruz 公司),DAB 顯色試劑盒(上海勁馬生物科技有限公司)


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