“上海勁馬”文獻(xiàn)：MK － 801 對(duì)腦缺血大鼠神經(jīng)功能缺損及腦 NGF 表達(dá)的影響
陳宏坤1，2 ，楊春壯3 ，徐 望4 ，王佩文4 ，張 曉4 ，王明月4 ，張立娜4
( 1. 佳木斯大學(xué)，黑龍江 佳木斯 154007; 2. 牡丹江第二人民醫(yī)院腦科醫(yī)院; 3. 牡丹江醫(yī)學(xué)院解剖教研室; 4. 牡丹江醫(yī)學(xué)院
2011 級(jí)臨床系本科生，黑龍江  牡丹江 157000)

摘要: 目的 觀察 MK － 801 對(duì)腦缺血大鼠神經(jīng)功能缺損及腦神經(jīng)生長(zhǎng)因子( NGF) 表達(dá)的影響，探討 MK － 801 治療腦缺血的機(jī)制。方法 采用線栓法制做腦缺血大鼠模型，將大鼠分為三組: 假手術(shù)組、模型組和藥物組，每組各 24 只。藥物組腹腔注射 MK － 801( 0. 6mg / kg / d) ，其余注射同容積生理鹽水。于注射后 3 天、7 天、14 天每組各取 8 只進(jìn)行神經(jīng)功能缺損評(píng)分及處死取腦，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)( ELISA 法) 測(cè)定 NGF 含量。結(jié)果 神經(jīng)功能缺損評(píng)分在第 3 天模型組和藥物組沒有顯著差異，第 7 天、第 14 天藥物組較模型組有顯著差異( P ＜ 0. 01) ; NGF 表達(dá)在第 3 天模型組和藥物組沒有顯著差異，但與假手術(shù)組有顯著差異( P ＜ 0. 001 或 P ＜ 0. 05) ，第 7 天、第 14 天藥物組較模型組有顯著差異( P ＜ 0. 001 或 P ＜ 0. 05) 。結(jié)論MK － 801 通過提高腦內(nèi) NGF 的表達(dá)，改善運(yùn)動(dòng)功能狀況可能是其治療缺血性腦血管疾病的機(jī)制。
關(guān)鍵詞: MK － 801 腦缺血 神經(jīng)功能缺損 NGF
中圖分類號(hào): Ｒ338     文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A 文章編號(hào): 1001 － 7550( 2015) 02 － 0034 － 03
腦血管疾病是目前公認(rèn)的僅次于惡性腫瘤和心血管疾病嚴(yán)重危害人類健康和生命的三大疾病，其中缺血性腦血管病( Ischemic cerebral vascular
disease，ICVD)  約占全部腦血管病的 80%  。ICVD具有高發(fā)病率、高死亡率、高致殘率、高復(fù)發(fā)率的特點(diǎn)，因而是基礎(chǔ)和臨床醫(yī)學(xué)科學(xué)研究的重點(diǎn)、熱點(diǎn)和難點(diǎn)。腦缺血的損傷包括多種病理過程，而興奮性毒性是其主要機(jī)制。地卓西平馬來酸鹽( MK －801) 是離子型谷氨酸受體拮抗劑。本研究采用線栓法建立大腦中動(dòng)脈閉塞( MCAO) 動(dòng)物模型，觀察不同時(shí)間點(diǎn)腦缺血大鼠神經(jīng)功能缺失癥狀以及神經(jīng)生長(zhǎng)因子( nerve  growth  factor，NGF)  表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化，探討 MK － 801 對(duì)局灶性腦缺血損傷神經(jīng)保護(hù)的可能作用機(jī)制。
1 材料和方法
1. 1  儀器和試劑  Multiskan MK3 酶標(biāo)儀( Thermo 熱電上海儀器有限公司)   ，大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子( NGF) 酶聯(lián)免疫試劑盒( 上海勁馬生物科技有限公司) 。

1. 2  動(dòng)物分組  健康成年 Wistar 大鼠 72 只，體重( 250 ± 50) g［由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào): SCXK( 黑) 2008004 ］，其中48 只制備腦缺血模型，之后再隨機(jī)分為 2 組，模型組 24 只，藥物組 24 只; 另外 24 只作為假手術(shù)組。

1. 3   模型制備   20% 烏拉坦( 1. 5g / kg) 行腹腔注射麻醉大鼠。頸正中消毒切開，在左側(cè)頸前肌旁分離頸總動(dòng)脈( CCA) 、頸外動(dòng)脈 ( ECA) 和頸內(nèi)動(dòng)脈( ICA) 。先結(jié)扎 CCA，并在其遠(yuǎn)端和動(dòng)脈分叉間掛線備用，再用動(dòng)脈夾暫時(shí)夾閉左 ECA 和 ICA，在結(jié)扎處和備用掛線之間的 CCA 剪口，將線栓順行插入并扎緊備用線，松開動(dòng)脈夾繼續(xù)下線，適當(dāng)調(diào)整進(jìn)線角度，直至尼龍線插入深度為距動(dòng)脈分叉約 18 ±0.5mm 處。術(shù)畢撒消炎粉，縫合創(chuàng)口。手術(shù)后符合以下 4 項(xiàng)體征即模型成功: ( 1) 動(dòng)物蘇醒后表現(xiàn)為提尾時(shí)右側(cè)前肢內(nèi)收屈曲; ( 2 ) 左側(cè) Hornor 氏征; ( 3) 爬行時(shí)向右劃圈; ( 4) 站立時(shí)右側(cè)傾倒。

1.4 給藥方法 各組于術(shù)后開始用藥，藥物組腹腔注射 MK － 801( 0. 6mg / kg / d) ，其余各組同時(shí)以等容量生理鹽水注射。

1. 5 神經(jīng)功能缺損評(píng)分 參照 Zea － longa［1］評(píng)定神經(jīng)系統(tǒng)缺損程度的 5 級(jí) 4 分法標(biāo)準(zhǔn): 0 分: 無神經(jīng)功能損傷癥狀，活動(dòng)正常。1 分: 輕微局灶性神經(jīng)功能缺損，懸尾試驗(yàn)不能完全伸展對(duì)側(cè)前爪。2 分: 中度局灶性神經(jīng)功能缺損，向癱瘓側(cè)旋轉(zhuǎn)征象。3 分: 重度局灶性神經(jīng)功能缺損，向病灶對(duì)側(cè)傾倒。4 分: 不能自發(fā)行走，意識(shí)水平下降。

======了解更多，請(qǐng)下載文獻(xiàn)或者前來咨詢我公司業(yè)務(wù)員哦，更多產(chǎn)品文獻(xiàn)等著您！我司正在進(jìn)行“積分換豪禮”，“預(yù)存返現(xiàn)”，“推薦享現(xiàn)金紅包”等優(yōu)惠活動(dòng)哦，更多優(yōu)惠詳情可咨詢我司業(yè)務(wù)員！期待您的參與！