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Ampligase® DNA Ligase W/Buffer epicentre A32250
產(chǎn)品簡介：北京中北林格供應(yīng)Ampligase® DNA Ligase W/Buffer epicentre A32250，中北林格是epicentre總代理，提供epicentre產(chǎn)品貨號報價查詢。其他包括lucigen總代理，cellscript總代理，Biosearch technologies總代理，epicentre總代理，illumina總代理，ICLLAB總代理，ImmunoReagents總代理。</p>
產(chǎn)品名稱:Ampligase® DNA Ligase W/Buffer
貨號:A32250
規(guī)格:250 U @ 5 U/μl
存儲溫度:-20℃
品牌：lucigen / epicentre</p>
供應(yīng)商：中北林格</p>
產(chǎn)地：us</p>
發(fā)貨地：北京</p
Ampligase® DNA Ligase W/Buffer epicentre A32250
應(yīng)用說明：
- 連接擴增（連接酶鏈反應(yīng)，LCR）1-7
- 重復(fù)擴增檢測（RED）。7
- 多位點同時突變。8,9
- 其他連接為基礎(chǔ)的檢測方法。
Ampligase® Thermostable DNA Ligase催化NAD-依賴的雙鏈DNA的3＇-羥基化和5＇-磷酸化末端的連接反應(yīng)，對熱穩(wěn)定。該酶來源于嗜熱細菌，與傳統(tǒng)DNA連接酶相比，該酶具有更高的活性和穩(wěn)定性。65°C時該酶半衰期為48小時，95°C時在1小時以上。
Ampligase DNA Ligase在500個以上熱循環(huán)后（16個小時循環(huán)）.10 這種高穩(wěn)定性保證了極高的雜交嚴謹性和連接特異性。Ampligase DNA Ligase無平端DNA連接活性，無RNA或RNA:DNA雜交體連接活性。
優(yōu)點說明
- 高熱穩(wěn)定性，保證可以使用更嚴謹?shù)碾s交溫度。
- 高特異性和嚴謹性能夠敏感檢測SNPs.11
活力單位定義: 1個活力單位的Ampligase DNA Ligase指在1X Ampligase Reaction緩沖液中，45°C條件下1分鐘能夠催化1 µg的lambda DNA中的50% cos位點發(fā)生連接。
Note:一個單位的Ampligase DNA Ligase等價于至少15個別處定義的 "cohesive end units"或 "nick ligation units"。4
儲存緩沖液: 50%甘油含有50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 0.1 M NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT和0.1% Triton® X-100。
Ampligase 10X反應(yīng)緩沖液: 200 mM Tris-HCl (pH 8.3), 250 mM KCl, 100 mM MgCl2, 5 mM NAD和0.1% Triton® X-100。
質(zhì)量控制: Ampligase Thermostable DNA Ligase的活性通過在45°C條件下連接Sma I消化后產(chǎn)生的平端噬菌體DNA進行檢測；電泳檢測連接只發(fā)生在cos位點。Ampligase DNA Ligase不含DNA外切、內(nèi)切核酸酶和RNA酶活性。
References
圖例說明
Figure 2. Ligation Amplification using Ampligase? DNA Ligase. Oligonucleotides A, B, C, ａnd D from Figure 1 (25 pmoles each) were incubated as in Figure 1 with 5 units of Ampligase DNA Ligase in 25 ?l of 1X Ampligase Reaction Buffer, with (+) or without (-) 0.25 pmole DNA template. The reactions were cycled 40 times for 1 minute at 94°C ａnd 2 minutes at 65°C, then separated by electrophoresis ａnd visualized with ethidium bromide. In the presence of template DNA, the target sequence is amplified by formation of the ligation products A+B ａnd C+D.
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