真核生物基因的轉(zhuǎn)錄起始需轉(zhuǎn)錄因子參與，轉(zhuǎn)錄因子通常由DNA結合結構域(DNA—binding domain，BD)和轉(zhuǎn)錄激活結構域(activation domain，AD)。用于酵母單雜交系統(tǒng)的酵母GAL4蛋白是一種典型的轉(zhuǎn)錄因子，GAL4的DNA結合結構域靠近羧基端，含有幾個鋅指結構，可激活酵母半乳糖苷酶的上游激活位點(UAS)，而轉(zhuǎn)錄激活結構域可與RNA聚合酶或轉(zhuǎn)錄因子TFIID相互作用，提高RNA聚合酶的活性。在這一過程中，DNA結合結構域和轉(zhuǎn)錄激活結構域可完全獨立地發(fā)揮作用。在GAL4系統(tǒng)中構建與基因的ORFs融合的激活結構域GAL4-AD的特異載體，順式作用元件與GAL4的DNA結合結構域GAL4-BD融合構建載體，分別轉(zhuǎn)化酵母細胞。在酵母內(nèi)表達的蛋白若與順式作用元件發(fā)生相互作用時，就會將GAL4-BD和GAL4-AD結合在一起，從而與上游激活序列(upstream activating sequence, UAS)結合，激活相應報告基因的表達，在相應的營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基上篩選陽性。    基因轉(zhuǎn)錄實際上是轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子和啟動子區(qū)各種順式作用元件相互作用的結果，這種結合猶如蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的互作一樣具有特異性，這是研究順式作用元件即DNA序列與蛋白質(zhì)互作的基礎。    我公司總經(jīng)理畢業(yè)于華中農(nóng)業(yè)大學生化與分子生物學專業(yè)，博士期間長期從事酵母單/雙雜交文庫構建及篩選（Clontech體系，針對胞漿蛋白和核蛋白）的工作，在校期間為實驗室構建了3個高效的水稻酵母雙雜交文庫（組織分別為水稻葉片，幼穗，種子），具有豐富的實踐經(jīng)驗。本公司在RNA抽提，mRNA純化，酵母轉(zhuǎn)化等步驟中對于試劑選擇有著獨到的見解，用性價比的試劑為客戶節(jié)約成本。同時公司對于反轉(zhuǎn)錄，酵母轉(zhuǎn)化，酵母菌落PCR等步驟進行優(yōu)化，使得初始基因豐度更高，程度保證互作基因/蛋白不致遺漏；轉(zhuǎn)化效率更高，提高弱互作因子篩到的可能性；均一化更高，降低重復篩到概率；空載體更少，高效并且節(jié)約成本。    通過RNA提彐取，mRNA分離，cDNA合成，cDNA長度分級，分級后的cDNA與酵母單雜交載體(pGADT7-Rec2）進行infusion重組，重組后產(chǎn)物轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞，文庫鋪板檢測與菌液保存獲得插入片段＞500bp（插入片段不是越長越好，較長的片段可能會漏篩部分較小片段的互作基因），重組率＞90%，庫容≥1 x 108 transformants，滴度≥2 x 107cfu/ml的酵母單雜交文庫。    客戶提供新鮮組織或細胞，25個工作日交付酵母單雜交文庫構建報告（電子版），酵母單雜交文庫構建圖片（電子版），轉(zhuǎn)化到酵母細胞的單雜交文庫甘油菌100ml。可用于酵母單雜交，酵母雙雜交，酵母三雜交文庫的篩選。真核生物基因的轉(zhuǎn)錄起始需轉(zhuǎn)錄因子參與，轉(zhuǎn)錄因子通常由DNA結合結構域(DNA—binding domain，BD)和轉(zhuǎn)錄激活結構域(activation domain，AD)。用于酵母單雜交系統(tǒng)的酵母GAL4蛋白是一種典型的轉(zhuǎn)錄因子，GAL4的DNA結合結構域靠近羧基端，含有幾個鋅指亠結構，可激活酵母半乳糖苷酶的上游激活位點(UAS)，而轉(zhuǎn)錄激活結構域可與RNA聚合酶或轉(zhuǎn)錄因子TFIID相互作用，提高RNA聚合酶的活性。在這一過程中，DNA結合結構域和轉(zhuǎn)錄激活結構域可完全獨立地發(fā)揮作用。在GAL4系統(tǒng)中構建與基因的ORFs融合的激活結構域GAL4-AD的特異載體，順式作用元件與GAL4的DNA結合結構域GAL4-BD融合構建載體，分別轉(zhuǎn)化酵母細胞。在酵母內(nèi)表達的蛋白若與順式作用元件發(fā)生相互作用時，就會將GAL4-BD和GAL4-AD結合在一起，從而與上游激活序列(upstream activating sequence, UAS)結合，激活相應報告基因的表達，在相應的營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基上篩選陽性。    基因轉(zhuǎn)錄實際上是轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子和啟動子區(qū)各種順式作用元件相互作用的結果，這種結合猶如蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的互作一樣具有特異性，這是研究順式作用元件即DNA序列與蛋白質(zhì)互作的基礎。    我公司總經(jīng)理畢業(yè)于華中農(nóng)業(yè)大學生化與分子生物學專業(yè)，博士期間長期從事酵母單/雙雜交文庫構建及篩選（Clontech體系，針對胞漿蛋白和核蛋白）的工作，在校期間為實驗室構建了3個高效的水稻酵母雙雜交文庫（組織分別為水稻葉片，幼穗，種子），具有豐富的實踐經(jīng)驗。本公司在RNA抽提，mRNA純化，酵母轉(zhuǎn)化等步驟中對于試劑選擇有著獨到的見解，用性價比的試劑為客戶節(jié)約成本。同時公司對于反轉(zhuǎn)錄，酵母轉(zhuǎn)化，酵母菌落PCR等步驟進行優(yōu)化，使得初始基因豐度更高，程度保證互作基因/蛋白不致遺漏；轉(zhuǎn)化效率更高，提高弱互作因子篩到的可能性；均一化更高，淳風生物科技,.淳風生物科技|||鄭州酵母單雜交文庫
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,西安淳風生物科技有限公司，分級后的cDNA與酵母單雜交載體(pGADT7-Rec2）進行infusion重組，重組后產(chǎn)物轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞，文庫鋪板檢測與菌液保存獲得插入片段＞500bp（插入片段不是越長越好，較長的片段可能會漏篩部分較小片段的互作基因），重組率＞90%，庫容≥1 x 108 transformants，滴度≥2 x 107cfu/ml的酵母單雜交文庫。    客戶提供新鮮組織或細胞，25個工作日交付酵母單雜交文庫構建報告（電子版），酵母單雜交文庫構建圖片（電子版），轉(zhuǎn)化到酵母細胞的單雜交文庫甘油菌100ml�？捎糜诮湍竼坞s交，酵母雙雜交，酵母三雜交文庫的篩選。真核生物基因的轉(zhuǎn)錄起始需轉(zhuǎn)錄因子參與，轉(zhuǎn)錄因子通常由DNA結合結構域(DNA—binding domain，BD)和轉(zhuǎn)錄激活結構域(activation domain，AD)。用于酵母單雜交系統(tǒng)的酵母GAL4蛋白是一種典型的轉(zhuǎn)錄因子，GAL4的DNA結合結構域靠近羧基端，含有幾個鋅指結構，可激活酵母半乳糖苷酶的上游激活位點(UAS)，而轉(zhuǎn)錄激活結構域可與RNA聚合酶或轉(zhuǎn)錄因子TFIID相互作用，提高RNA聚合酶的活性。在這一過程中，DNA結合結構域和轉(zhuǎn)錄激活結構域可完全獨立地發(fā)揮作用。在GAL4系統(tǒng)中構建與基因的ORFs融合的激活結構域GAL4-AD的特異載體，順式作用元件與GAL4的DNA結合結構域GAL4-BD融合構建載體，分別轉(zhuǎn)化酵母細胞。在酵母內(nèi)表達的蛋白若與順式作用元件發(fā)生相互作用時，就會將GAL4-BD和GAL4-AD結合在一起，從而與上游激活序列(upstream a



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