實驗原理：
酵母雙雜交系統(tǒng)是在酵母體內(nèi)通過重建有活性轉錄因子的結構來鑒定蛋白質之間的相互作用。轉錄因子可以和DNA上特異的序列結合而啟動相應基因的轉錄。這種DNA結合與轉錄激活的功能是由轉錄因子上兩個相互獨立的結構域即DNA結合結構域(Binding Domain, BD)和轉錄激活結構域(Activation Domain, AD)分別來完成的，并且這兩個結構域對于基因的轉錄激活都是必須的。在GAL4系統(tǒng)中利用轉錄因子GAL4的DNA結合結構域GAL4-BD與激活結構域GAL4-AD的特異載體，分別與基因的ORFs融合，轉化酵母細胞。在酵母內(nèi)表達的蛋白若發(fā)生相互作用時，就會將GAL4-BD和GAL4-AD結合在一起，從而與上游激活序列(upstream activating sequence, UAS)結合，激活相應報告基因的表肀達，在相應的營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基上篩選陽性。
實驗目的：
酵母雙雜交文庫的構建是篩庫的前提，可用于目的蛋白的互作蛋白大規(guī)模篩選分析蛋白質間的相互作用，是現(xiàn)在分子生物學與生物化學常用的手段。
實驗步驟
1.1.RNA提取
1.2.mRNA分離
1.3.cDNA合成
1.4.cDNA長度分級
1.5.分級后的cDNA與酵母雙雜交載體(pGADT7-Rec)進行infusion重組
1.6.重組后產(chǎn)物轉化感受態(tài)細胞
1.7.文庫鋪板檢測與菌液保存
技術指標
 1. 插入片段＞500bp（插入片段不是越長越好，較長的片段可能會漏篩部分較小片段的互作基因），
 2. 重組率＞90%，
 3.  庫容≥1 x 108 transformants，
 4. 滴度≥2 x 107cfu/ml。
交付結果
1. 文庫構建報告（電子版），
2. 文庫構建圖片（電子版），
3. 轉化到酵母細胞的雙雜交文庫甘油菌。
服務周期
25個工作日
材料條件
客戶提供組織或細胞
實驗原理：
酵母雙雜交系統(tǒng)是在酵母體內(nèi)通過重建有活性轉錄因子的結構來鑒定蛋白質之間的相互作用。轉錄因子可以和DNA上特異的序列結合而啟動相應基因的轉錄。這種DNA結合與轉錄激活的功能是由轉錄因子上兩個相互獨立的結構域即DNA結合結構域(Binding Domain, BD)和轉錄激活結構域(Activation Domain, AD)分別來完成的，并且這兩個結構域對于基因的轉錄激活都是必須的。在GAL4系統(tǒng)中利用轉錄因子GAL4的DNA結合結構域GAL4-BD與激活結構域GAL4-AD的特異載體，淳風生物科技,.淳風生物科技，西安酵母雙雜交文庫構建
,西安淳風生物科技有限公司，分別與基因的ORFs融合，轉化酵母細胞。在酵母內(nèi)表達的蛋白若發(fā)生相互作用時，就會將GAL4-BD和GAL4-AD結合在一起，從而與上游激活序列(upstream activating sequence, UAS)結廾合，激活相應報告基因的表達，在相應的營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基上篩選陽性。
實驗目的：
酵母雙雜交文庫的構建是篩庫的前提，可用于目的蛋白的互作蛋白大規(guī)模篩選分析蛋白質間的相互作用，是現(xiàn)在分子生物學與生物化學常用的手段。
實驗步驟
1.1.RNA提取
1.2.mRNA分離
1.3.cDNA合成
1.4.cDNA長度分級
1.5.分級后的cDNA與酵母雙雜交載體(pGADT7-Rec)進行infusion重組
1.6.重組后產(chǎn)物轉化感受態(tài)細胞
1.7.文庫鋪板檢測與菌液保存
技術指標
 1. 插入片段＞500bp（插入片段不是越長越好，較長的片段可能會漏篩部分較小片段的互作基因），
 2. 重組率＞90%，
 3.  庫容≥1 x 108 transformants，
 4. 滴度≥2 x 107cfu/ml。
交付結果
1. 文庫構建報告（電子版），
2. 文庫構建圖片（電子版），
3. 轉化到酵母細胞的雙雜交文庫甘油菌。
服務周期
25個工作日
材料條件
客戶提供組織或細胞
實驗原理：
酵母雙雜交系統(tǒng)是在酵母體內(nèi)通過重建有活性轉錄因子的結構來鑒定蛋白質之間的相互作用。轉錄因子可以和DNA上特異的序列結合而啟動相應基因的轉錄。這種DNA結合與轉錄激活的功能是由轉錄因子上兩個相互獨立的結構域即DNA結合結構域(Binding Domain, BD)和轉錄激活結構域(Activation Domain, AD)分別來完成的，并且這兩個結構域對于基因的轉錄激活都是必須的。在GAL4系統(tǒng)中利用轉錄因子GAL4的DNA結合結構域GAL4-BD與激活結構域GAL4-AD的特異載體，分別與基因的ORFs融合，轉化酵母細胞。在酵母內(nèi)表達的蛋白若發(fā)生相互作用時，就會將GAL4-BD和GAL4-AD結合在一起，從而與上游激活序列(upstream activating sequence, UAS)結合，淳風生物科技,.淳風生物科技，西安酵母雙雜交文庫構建
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實驗目的：
酵母雙雜交文庫的構建是篩庫的前提，可用于目的蛋白的互作蛋白大規(guī)模篩選分析蛋白質間的相互作用，是現(xiàn)在分子生物學與生物化學常用的手段。
實驗步驟
1.1.RNA提取
1.2.mRNA分離
1.3.cDNA合成
1.4.cDNA長度分級
1.5.分級后的cDNA與酵母雙雜交載體(pGADT7-Rec)進行infusion重組
1.6.重組后產(chǎn)物轉化感受態(tài)細胞
1.7.文庫鋪板檢測與菌液保存
技術指標
 1. 插入片段＞500bp（插入片段不是越長越好，較長的片段可能會漏篩部分較小片段的互作基因），
 2. 重組率＞90%，
 3.  庫容≥1 x 108 transformants，
 4. 滴度≥2 x 107cfu/ml。
交付結果
1. 文庫構建報告（電子版），
2. 文庫構建圖片（電子版），
3. 轉化到酵母細胞的雙雜交文庫甘油菌。
服務周期
25個工作日
材料條件
客戶提供組織或細胞

.淳風生物科技___西安酵母雙雜交文庫構建