真核生物基因的轉(zhuǎn)錄起始需轉(zhuǎn)錄因子參與，轉(zhuǎn)錄因子通常由DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(DNA—binding domain，BD)和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域(activation domain，AD)。用于酵母單雜交系統(tǒng)的酵母GAL4蛋白是一種典型的轉(zhuǎn)錄因子，GAL4的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域靠近羧基端，含有幾個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)，可激活酵母半乳糖苷酶的上游激活位點(diǎn)(UAS)，而轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域可與RNA聚合酶或轉(zhuǎn)錄因子TFIID相互作用，提高RNA聚合酶的活性。在這一過程中，DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域可完全獨(dú)立地發(fā)揮作用。在GAL4系統(tǒng)中構(gòu)建與基因的ORFs融合的激活結(jié)構(gòu)域GAL4-AD的特異載體，順式作用元件與GAL4的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域GAL4-BD融合構(gòu)建載體，分別轉(zhuǎn)化酵母細(xì)胞。在酵母內(nèi)表達(dá)的蛋白若與順式作用元件發(fā)生相互作用時(shí)，就會(huì)將GAL4-BD和GAL4-AD結(jié)合在一起，從而與上游激活序列(upstream activating sequence, UAS)結(jié)合，激活相應(yīng)報(bào)告基因的表達(dá)，在相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基上篩選陽(yáng)性。
    基因轉(zhuǎn)錄實(shí)際上是轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子和啟動(dòng)子區(qū)各種順式作用元件相互作用的結(jié)果，這種結(jié)合猶如蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的互作一樣具有特異性，這是研究順式作用元件即DNA序列與蛋白質(zhì)互作的基礎(chǔ)。
    我公司總經(jīng)理畢業(yè)于華中農(nóng)業(yè)大學(xué)生化與分子生物學(xué)專業(yè)，博士期間長(zhǎng)期從事酵母單/雙雜交文庫(kù)構(gòu)建及篩選（Clontech體系，針對(duì)胞漿蛋白和核蛋白）的工作，在校期間為實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建了3個(gè)高效的水稻酵母雙雜交文庫(kù)（組織分別為水稻葉片，幼穗，種子），具有豐富的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。本公司在RNA抽提，mRNA純化，酵母轉(zhuǎn)化等步驟中對(duì)于試劑選擇有著獨(dú)到的見解，用性價(jià)比的試劑為客戶節(jié)約成本。同時(shí)公司對(duì)于反轉(zhuǎn)錄，酵母轉(zhuǎn)化，酵母菌落PCR等步驟進(jìn)行優(yōu)化，使得初始基因豐度更高，程度保證互作基因/蛋白不致遺漏；轉(zhuǎn)化效率更高，提高弱互作因子篩到的可能性；均一化更高，降低重復(fù)篩到概率；空載體更少，高效并且節(jié)約成本。
    通過RNA提取，mRNA分離，cDNA合成，cDNA長(zhǎng)度分級(jí)，分級(jí)后的cDNA與酵母單雜交載體(pGADT7-Rec2）進(jìn)行infusion重組，重組后產(chǎn)物轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞，文庫(kù)鋪板檢測(cè)與菌液保存獲得插入片段＞500bp（插入片段不是越長(zhǎng)越好，較長(zhǎng)的片段可能會(huì)漏篩部分較小片段的互作基因），重組率＞90%，庫(kù)容≥1 x 108 transformants，滴度≥2 x 107cfu/ml的酵母單雜交文庫(kù)。
    客戶提供新鮮組織或細(xì)胞，25個(gè)工作日交付酵母單雜交文庫(kù)構(gòu)建報(bào)告（電子版），酵母單雜交文庫(kù)構(gòu)建圖片（電子版），淳風(fēng)生物科技,.淳風(fēng)生物科技|||西寧酵母單雜交文庫(kù)實(shí)驗(yàn)外包
,西安淳風(fēng)生物科技有限公司，轉(zhuǎn)化到酵母細(xì)胞的單雜交文庫(kù)甘油菌100ml。可用于酵母單雜交，酵母雙雜交，酵母三雜交文庫(kù)的篩選。
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真核生物基因的轉(zhuǎn)錄起始需轉(zhuǎn)錄因子參與，轉(zhuǎn)錄因子通常由DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(DNA—binding domai氵n，BD)和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域(activation domain，AD)。用于酵母單雜交系統(tǒng)的酵母GAL4蛋白是一種典型的轉(zhuǎn)錄因子，GAL4的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域靠近羧基端，含有幾個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)，可激活酵母半乳糖苷酶的上游激活位點(diǎn)(UAS)，而轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域可與RNA聚合酶或轉(zhuǎn)錄因子TFIID相互作用，提高RNA聚合酶的活性。在這一過程中，DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域可完全獨(dú)立地發(fā)揮作用。在GAL4系統(tǒng)中構(gòu)建與基因的ORFs融合的激活結(jié)構(gòu)域GAL4-AD的特異載體，順式作用元件與GAL4的DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域GAL4-BD融合構(gòu)建載體，分別轉(zhuǎn)化酵母細(xì)胞。在酵母內(nèi)表達(dá)的蛋白若與順式作用元件發(fā)生相互作用時(shí)，就會(huì)將GAL4-BD和GAL4-AD結(jié)合在一起，從而與上游激活序列(upstream activating sequence, UAS)結(jié)合，激活相應(yīng)報(bào)告基因的表達(dá)，在相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基上篩選陽(yáng)性。
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