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技術(shù)文章
人胰島素樣生長因子操作方法
點擊次數(shù):434 發(fā)布時間:2011/3/28 9:34:51
人胰島素樣生長因子操作步驟:1.;使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2.;根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3.;加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4.;甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。5.;每孔加入80ul的親和鏈酶素-hrp,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。6.;每孔加入底物a、b各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。7.;取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。8.;在450nm波長處測定各孔的od值。
原創(chuàng)作者:杭州旺森科技有限公司