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技術(shù)文章
瓊脂凝膠擴散試驗（AGP）診斷禽流感
點擊次數(shù)：684 發(fā)布時間：2011/3/24 9:26:43
AGP是在瓊脂凝膠中進(jìn)行的抗原-抗體免疫沉淀反應(yīng)，主要用于病毒抗原型特異性鑒定，即用已知陽性血清和未知抗原進(jìn)行AGP試驗。AGP是用來檢測A屬（型）流感病毒特異性血清抗體，即抗RNA-核蛋白（即RNP）和基質(zhì)蛋白（M1）抗體，因而適用于鑒定流感病毒。1970年Beard首次將AGP用于禽流感Ab的檢測。
該法優(yōu)點是簡便快捷，特異性強，不受病毒亞型限制，缺點是靈敏性較低。
目前AGP法中*常用的是免疫雙擴散，與普通AGP法相比，不僅提高了其敏感度，且快速省時，以此法為獲得了良好的結(jié)果。Ag制備：感染雞胚尿囊膜磨碎，反復(fù)凍融或超聲裂解，然后低速離心，上清滅活即可。1987年，我國學(xué)者報道了用AIV尿囊液經(jīng)超速離心、濃縮，用福爾馬林滅活制備Ag，效果較好。趙增連等在瓊脂板中加入3％的PECk6000，則AGP的敏感性提高，且快速省時。
免疫單輻射擴散試驗、單輻射溶血試驗、對流免疫電泳等也常用于AIV及其抗體的檢測，但這幾種免疫沉淀試驗都需在凝膠中進(jìn)行，敏感性較差，對低滴度樣品都會出現(xiàn)假陽性結(jié)果，而且AGP所需試劑及Ag、Ab的量較大。所以尋找更敏感的微量、快速的檢測和診斷方法很有必要。
原創(chuàng)作者：杭州旺森科技有限公司
