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技術(shù)文章
細(xì)胞免疫染色復(fù)染
點(diǎn)擊次數(shù)：601 發(fā)布時(shí)間：2011/3/24 18:16:08
復(fù)染常有助于在細(xì)胞免疫染色中鑒別不同的細(xì)胞類型，或者亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。這對(duì)組織切片來(lái)說(shuō)是基本步驟，并可鑒定細(xì)胞的類型。也可用于其他染色反應(yīng)。復(fù)染不能使用熒光染料，因其復(fù)染后可產(chǎn)生自發(fā)熒光。為了選擇一種適宜的復(fù)染方法，首先應(yīng)檢測(cè)細(xì)胞染色試劑是否在乙醇中可溶。
1．不溶于乙醇的方法
（1）用水輕輕洗滌標(biāo)本片；
（2）加數(shù)滴Harris蘇木精（商品化試劑）于標(biāo)本中，孵育約5min。染色時(shí)間的長(zhǎng)短決定染色的強(qiáng)度；
（3）用水輕輕洗滌；
（4）用0．5％冰乙酸／99．5％乙醇處理標(biāo)本片大約10rain；
（5）用水輕輕洗滌；
（6）用DPX封片。
2．溶于乙醇的方法
（1）用水輕輕洗滌標(biāo)本片；
（2）加數(shù)滴Mayer蘇木精（商品化試劑）至標(biāo)本片，孵育大約5min，染色時(shí)間的長(zhǎng)短決定染色的強(qiáng)度；
（3）用水輕輕洗滌；
（4）用30mm01／L氫氧化銨重復(fù)處理標(biāo)本片
（5）用水輕輕洗滌；
（6）用Gelvat01或MOWi。1封片。
| 復(fù)染 | 推薦用法 | 需準(zhǔn)備試齊 | 優(yōu) 點(diǎn) | 缺 點(diǎn) |
| 蘇木精 | 可用于黑色或棕色染料；用于核或細(xì)胞質(zhì)抗原染色 | 可購(gòu)買 | 可保存的信息量大；核大 | 染色很暗，不適合弱抗原信號(hào)的顯示 |
| 甲基綠 | 可用黑色或棕色染色，用于核抗原染色 | 貯存液二1％甲基綠溶于100mmol/L 酸鈉（pH5.5）；工作液為0．1％ | 染色淺，適用于弱抗原信號(hào)，胞質(zhì)大 | 獲得的組織或細(xì)胞精細(xì)資料有限 |
| 堅(jiān)固紅 | 用于藍(lán)色染色或LacZ檢測(cè)，可用于核或細(xì)胞質(zhì)抗原染色 | 可購(gòu)買 | | 著色很淺，獲得的組織或細(xì)胞精細(xì)資料有限 |
原創(chuàng)作者：杭州旺森科技有限公司
