產(chǎn)品展示
Tris-氯化銨紅細胞裂解液配制方法
點擊次數(shù)：81發(fā)布時間：2017/12/13 14:13:44
更新日期：2019/11/22 9:41:55
所 在 地：中國大陸
產(chǎn)品型號：
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細內(nèi)容
上海遠慕生物科技詳細講述Tris-氯化銨紅細胞裂解液配制方法，操作步驟，注意事項，產(chǎn)品用途，產(chǎn)品說明書，規(guī)格，保存條件等咨訊，歡迎來電訂購！
中文名：Tris-氯化銨紅細胞裂解液
供應(yīng)商：上海遠慕
產(chǎn)品規(guī)格：100ml
分類：細胞組分離
儲存方式：4℃,12個月
產(chǎn)品用途：Tris-NH4CL法溶解紅細胞,去除細胞懸液中的紅細胞
說明：無菌溶液，pH值為7.2，經(jīng)過濾除菌處理
Tris-氯化銨紅細胞裂解液說明
1.本品是一種從人，鼠或其他哺乳動物等體內(nèi)的組織樣品或血液中裂解并去除無核紅細胞的溶！主要有效成分為氯化銨，本品經(jīng)過優(yōu)化配方后，在裂解無核紅細胞的同時幾乎不損傷淋巴細(lymphocyte)或其它有細胞核的細胞。
2.本品經(jīng)過濾除菌，經(jīng)過Tris-NH4ClLysisBuffer處理過的血液或組織細胞樣品可以用于后續(xù)的細胞培養(yǎng)、細胞融合以及核酸或蛋白的提取及各種常規(guī)的分析和檢測。
公司介紹
遠慕生物是家專業(yè)代理生產(chǎn)銷售為一體的優(yōu)質(zhì)科研試劑供應(yīng)商，已和國內(nèi)多所高校，醫(yī)院，事業(yè)單位，生物公司，科研院等達成了長期合作關(guān)系 ，由我們?yōu)槠涮峁┎煌盗械倪M口試劑及國產(chǎn)試劑，包含有：ELISA試劑盒，培養(yǎng)基，抗體，氨基酸，細胞株，微生物，生物分子，生化試劑，生物試劑，染色液，緩沖液，溶液，實驗耗材，動物血清血漿，標準品對照品，其他系列試劑等，品種齊全，價格實惠，我們還提供ELISA試劑盒免費代測服務(wù)，歡迎來電咨詢，我們將竭誠為您解答每一個問題！
Tris-氯化銨紅細胞裂解液操作步驟
1.制備細胞懸液：新鮮組織經(jīng)過胰蛋白酶或膠原酶等消化處理，通過適當(dāng)方法制備成細胞懸液，離心棄上清；
2.裂解：加入細胞5倍細胞沉淀體積的Tris-NH4Cl Lysis Buffer，輕柔吹打混勻，裂 解1～2min。本操作步驟在4℃條件下操作更佳，亦可在室溫下操作；
3.加入15～20ml的 PBS、HBSS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液，輕柔混勻；
4.離心：4℃，400～500g離心5min，棄紅色上清，本步驟亦可在室溫下操作；
5.如果發(fā)現(xiàn)紅細胞裂解不完全，可以重復(fù)上述步驟2～4各一次；
6.根據(jù)實驗需要用適當(dāng)溶液重懸細胞沉淀，進行計數(shù)、培養(yǎng)等后續(xù)實驗。
Tris-氯化銨紅細胞裂解液配制方法
1.10 g葡萄糖+0.6 g磷酸二氫鉀+3.58 g磷酸氫二鈉（7H2O）+20 ml 5 g/L酚紅溶液；加雙蒸水定容至1 000 ml。
2.1.86 g氯化鈣（2H2O）+4.0 g氯化鉀+80 g氯化鈉+1.04 g氯化鎂+2.0 g硫酸鎂（7H2O）；加雙蒸水定容至1 000 ml。
注：應(yīng)用液有3種
a，10 ml原液1號+10 ml原液2號，加雙蒸水定容至100 ml
b，20 ml原液1號+20 ml原液2號，加雙蒸水定容至100 ml
c，1ml原液1號+1 ml原液2號，加雙蒸水定容至100 ml
3.紅細胞裂解
取100 μl抗凝全血、加2 ml應(yīng)用液3#、混勻15～20 s、加2 ml應(yīng)用液2#、混勻15～20 s、加4 ml應(yīng)用液1#、混勻15～20 s、300×g離心2 min、棄上清、收集沉淀、加PBS緩沖液、制成白細胞懸液、備用。
4.紅細胞裂解液(0.01mol/L Tris-HCL pH7.6、0.01mol/L NaCl、0.005mol/L MgCl2)。
5.紅細胞裂解液（139.6 mmol/L NH4Cl、16.96 mmol/L Tris、用1 mol/L HCl調(diào) pH至7.2）。
6.紅細胞裂解液的制備：碳酸氫鉀（KHCO3）1.0g、氯化氨（NH4CL）8.3g、EDTA-Na2 0.037g、加雙蒸水至1000ml，即工作液。
Tris-氯化銨紅細胞裂解液配制方法注意事項
1.制備細胞懸液是應(yīng)根據(jù)具體實驗需要；不一定要制備成單細胞懸液。
2.后續(xù)試驗如果是用于細胞培養(yǎng)；操作過程中應(yīng)注意無菌操作；盡量在超凈工作臺內(nèi)操作。
3.離心步驟盡量在4℃離心機上操作。
4.離心洗滌后；通常極微量的紅細胞不會影響后續(xù)的檢測。
5.如果經(jīng)過Tris-NH4Cl Lysis Buffer處理后的樣品后續(xù)用于總RNA的提��；在處理細胞時不必使用DEPC處理的溶液；即無需在該操作中特意去除RNase。
6.為了您的安全和健康；請穿實驗服并戴一次性手套操作。
7.在實際操作過程中；一定要按照說明書的要求進行正確的操作。
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