產(chǎn)品展示
葡聚糖凝膠LH-20層析原理
點(diǎn)擊次數(shù):51發(fā)布時間:2017/11/28 10:06:10

更新日期:2019/11/22 17:01:48
所 在 地:中國大陸
產(chǎn)品型號:
優(yōu)質(zhì)供應(yīng)
詳細(xì)內(nèi)容
葡聚糖凝膠LH-20層析原理產(chǎn)品簡介:
中文名:葡聚糖凝膠LH-20
英文名:Sephadex LH-20
供應(yīng)商:上海遠(yuǎn)慕
規(guī)格:25g,100g,500g
工作Ph:2-11
球蛋白分離范圍:100-4000
操作溫度:4-40度
保存條件:4-25度
基質(zhì):交聯(lián)葡聚糖
排阻極限:4-5kd(與所用溶劑有關(guān))
性狀:多孔,白色微球

葡聚糖凝膠 LH-20分離原理:
1.葡聚糖凝膠 LH-20的分離原理主要有兩方面:以凝膠過濾作用為主,兼具反相分配的作用(在反相溶劑中)。因?yàn)槟z過濾作用,所以大分子的化合物保留弱,先被洗脫下來,小分子的化合物保留強(qiáng),*后出柱。
2.如果使用反相溶劑洗脫, Sephadex LH-20對化合物還起反相分配的作用,所以極性大的化合物保留弱,先被洗脫下來,極性小的化合物保留強(qiáng),后出柱。 如果使用正相溶劑洗脫,這主要靠凝膠過濾作用來分離。
葡聚糖凝膠 LH-20產(chǎn)品用途:
2.可以用于含有機(jī)溶劑的溶液中,而葡聚糖凝膠G25只能用于水中。
葡聚糖凝膠 LH-20說明:
ephadex LH-20適合用于有機(jī)溶劑分離嗜脂性分子,天然產(chǎn)物在有機(jī)溶劑中的純化?梢苑浅=(jīng)濟(jì)的大規(guī)模制備各種天然產(chǎn)物,尤其在中藥有效成分提取中作為大孔吸附樹脂解析物的純化。
結(jié)合凝膠過濾﹑分配色譜及吸附層析于一身,能分離結(jié)構(gòu)相近的分子。因此使用中要考略幾種色譜的作用機(jī)制。 載量可達(dá)250mg樣品/ml凝膠﹑極少需要再生﹑使用得當(dāng),分離效果可保持不變。
上樣量視被分離物的結(jié)構(gòu)性能的差異而定:差異大,則大;差異小,則小。凝膠過濾的上樣量一般為5-7%的床體積,我們建議初次上樣量控制在1-2%的床體積,視分離情況可以逐步增加;柱高的選擇也與分離要求相關(guān)――難分物質(zhì)要有一定柱高和流速控制;流動相可參考TLC的條件,正確的流動相可以提高分離度并縮短分離時間。
1. 凝膠過濾:依賴于分子的大小和形狀。
2. 吸附層析:依賴于被分離化合物與凝膠之間的氫鍵作用。
3. 分配層析:依賴于被分離化合物在流動相(溶劑)和固定相(凝膠)之間的分配,這主要由樣品的極性和溶劑的極性決定的。
1. 適合用有機(jī)溶劑分離嗜脂性分子,可以非常經(jīng)濟(jì)地大規(guī)模制備各種天然產(chǎn)物。
2. 結(jié)合凝膠過濾,分配色譜及吸附性層析于一身,分離結(jié)構(gòu)非常相近的分子。
3. 載量可高達(dá)300mg樣品/ml凝膠,極少需要再生,分離效果可保持十幾年不變。
葡聚糖凝膠LH-20操作流程:
1.選擇條件: 梯度洗脫在葡聚糖凝膠 LH-20使用中并不象在正相柱層析中那么重要。首先你的樣品須要能溶解在盡量少量的洗脫劑中。極性大的用甲醇水系統(tǒng);極性小者一般用不含水的系統(tǒng)。我們實(shí)驗(yàn)室常用正己烷二氯甲烷甲醇系統(tǒng),用了很多年,效果較好。
2.飽和層析柱:用洗脫劑將凝膠搖勻,直立柱身,讓其自然沉降,此時要防止氣泡留在其中。至少半小時打開開關(guān),流出幾個柱體種的洗脫劑,目的是使其膨脹在正確比例的洗脫劑中。
3. 樣品處理:用盡量少的洗脫劑溶解樣品,常壓過濾。
4.濕法上柱。這也是要有技巧的步驟。
5.洗脫:控制流速,一般1drop/s以下,可參見廠家的一些參數(shù);必要時更改極性(很多時一個極性就可以將樣品洗脫完畢)。再生以備下次使用。
1.分離時流速不可太快,切切不可心急,所謂欲速則不達(dá);接餾分時可開全速,節(jié)省時間。
2.柱子盡可能長,葡聚糖凝膠LH-20柱長的增加將極大地改善分離,所不要吝惜填料,寧可將填料全裝在一根大柱子中,不要將填料裝成幾根小柱。所謂集中優(yōu)勢兵力,打擊敵人。
3.餾分一定要接的細(xì),可1/10,或1/20 個保留體積接成一餾分。
4.洗脫體積一般為2-3個保留體積,對特殊保留強(qiáng)的化合物,可洗脫5個保留體積。
6.填料反復(fù)使用,每次用完,一般可用甲醇將柱子洗干凈,然后用下一次分離的起步溶劑將甲醇替換出來,待用。暫時不用試可以水洗→含水醇洗(醇的濃度逐步遞增)→醇洗,*后泡在醇中貯于磨口瓶中備用。如長期不用時,可在以上處理基礎(chǔ)上,減壓抽干,再用少量乙迷洗凈抽干,室溫充分揮散至無醚味后,60~80°C干燥后保存。
葡聚糖凝膠LH-20相關(guān)產(chǎn)品如下:
葡聚糖凝膠 G-50
葡聚糖凝膠 G-200
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標(biāo)簽:葡聚糖凝膠LH-20層析原理