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常用的生物試劑

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上 傳 者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

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1.蛋白酶K：
能水解消化蛋白質(zhì)，特別是與DNA結(jié)合的組蛋白。再尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml，推薦反應(yīng)緩沖液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2。
 
2.SDS:
      十二烷基硫酸鈉. 溶解細(xì)胞膜上的脂類(lèi)與蛋白質(zhì)，因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜，并解離細(xì)胞中的核蛋白，SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀
 
3.IPTG
      異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等. IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似，所以它和乳糖一樣，可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合，使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化，四聚體解聚成單體，失去與操縱子特異性結(jié)合的能力，從而解除了阻遏蛋白的作用，使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類(lèi)。與乳糖不同的是，IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍(lán)白斑篩選。作用極強(qiáng)的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定
 
4.X-gal
5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，是IPTG的顯色試劑，在IPTG的催化下顯藍(lán)色。常跟IPTG一起用與藍(lán)白斑篩選。

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