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什么是LB培養(yǎng)基，以及LB培養(yǎng)基的的分類(lèi)
什么是LB培養(yǎng)基？LB培養(yǎng)基是一種培養(yǎng)基的名稱(chēng)，是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中*常用的培養(yǎng)基，生化分子實(shí)驗(yàn)中一般用該培養(yǎng)基來(lái)預(yù)培養(yǎng)菌種,使菌種成倍擴(kuò)增,達(dá)到使用要求.可分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。
LB培養(yǎng)基的分類(lèi)
液態(tài)LB培養(yǎng)基
根據(jù)《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》（J.薩姆布魯克D.W.拉塞爾著）配制每升培養(yǎng)基,應(yīng)該在950 ml去離子水中加入:
蛋白胨 10g
酵母提取物 5g
NaCl 10g
搖動(dòng)容器直至溶質(zhì)溶解.用5mol/LNaOH調(diào)pH至7.0.用去離子水定容至1L.在15psi高壓下蒸汽滅菌21min.
培養(yǎng)的菌種一般是經(jīng)過(guò)改造的無(wú)法在外界環(huán)境單獨(dú)存活和擴(kuò)增的工程菌.通過(guò)培養(yǎng)工程菌,我們可以表達(dá)大量的外源蛋白,也可以拿到帶有外源基因的質(zhì)粒,工程菌的有效擴(kuò)增是生化分子實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ).
LB培養(yǎng)基的配方如下:
胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L
酵母提取物(Yeast extract) 5g/L
氯化鈉(NaCl) 10g/L
另外根據(jù)經(jīng)驗(yàn)值用NaOH調(diào)節(jié)該培養(yǎng)基的pH,使其達(dá)到7.4(該pH適合目前使用*廣的原核表達(dá)菌種E.coli的生長(zhǎng))
固態(tài)LB培養(yǎng)基
LB固體培養(yǎng)基1L和液體一樣，加10g~15g瓊脂粉，一定要在溫度降下之前加好抗生素，并且倒好板。
LB培養(yǎng)基的配制：
成分
胰蛋白胨(tryptone) 10g
酵母提取物(yeast extract) 5g
氯化鈉(NaCl) 10g
固體培養(yǎng)基另加 瓊脂粉 15-20g
加雙蒸水至1000mL, 用5mol/L NaOH（約0.2ml）調(diào)pH至7.2，121℃滅菌30min
配制方法
（1）稱(chēng)量 分別稱(chēng)取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl，置于燒杯中。
（2）溶化 加入所需水量2/3的蒸餾水于燒杯中，用玻棒攪拌，使藥品全部溶化。
（3）調(diào)pH 用1mol/L NaOH溶液調(diào)pH至7.2。
（4）定容 將溶液倒入量筒中，加水至所需體積。
（5）加瓊脂 加入所需量瓊脂，加熱融化，補(bǔ)足失水。
（6）分裝、加塞、包扎。
（7）高壓蒸汽滅菌100Pa滅菌20min。
以上便是LB培養(yǎng)基的簡(jiǎn)單介紹以及分類(lèi)和配制方法。LB培養(yǎng)基由蛋白胨、酵母膏、nacl組成。首先,蛋白胨是經(jīng)過(guò)胰酶處理過(guò)的蛋白，處理后,大分子的蛋白分子量變小，細(xì)菌更容易利用。此外，還含有嘌呤，提供生長(zhǎng)因子。如要培養(yǎng)大腸桿菌，其實(shí)用普通蛋白胨代替胰蛋白胨是沒(méi)有問(wèn)題的。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
