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遠(yuǎn)慕生物:來告訴您細(xì)胞污染如何根除!
點擊次數(shù)：224 發(fā)布時間：2019/9/16 10:53:56
培養(yǎng)細(xì)胞一經(jīng)污染，大都較難處理。假如污染細(xì)胞價值不大，宜棄之；有細(xì)胞株留存的或可購置的，可在尋找原因后徹底消毒操作室，復(fù)蘇或重新購置細(xì)胞，再培養(yǎng)。若污染細(xì)胞價值較大，又難于重新得到，可采納以下辦法根除。
（一）運(yùn)用抗生素
抗生素對殺滅細(xì)菌較有用。聯(lián)合用藥比單獨用藥作用好。防范用藥比污染后再用藥作用好。防范用藥一般用雙抗生素（青霉素100u/mL加鏈霉素100μg/mL），污染后根除用藥需選用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～48小時，再換常規(guī)培養(yǎng)液。
此法在污染早期或許有用。所用抗生素品種除青霉素、鏈霉素外，還可用慶大霉素、卡那霉素、多粘菌素、四環(huán)素、制霉菌素等。常用400～800μg/mL卡那霉素或200μg/mL四環(huán)素處理，每隔2～3日換液1次，傳1～2代進(jìn)行治療。
近年來有報導(dǎo)，4-氟，2-羥基喹啉（Ciprofloxacin,Cip）、截耳素衍生物（Pleu-romutilinderivative,BM-Cyclin2:BM-1和四環(huán)素衍生物（BM-2）等三種抗生素單用或合用對殺滅支原體有用。
這三種抗生素均用配成250X濃縮液，-20℃保存?zhèn)溆茫\(yùn)用濃度Cip為10μg/mL，BM-1為10μg/mL，BM-2為5μg/mL。運(yùn)用時先吸除污染的培養(yǎng)液，參與含BM-1的RPMI1640培養(yǎng)液，3天后再吸除培養(yǎng)液，參與含BM-2的RPMI1640培養(yǎng)液，培養(yǎng)4天，如此接連3個輪次，直至用33258熒光染色鏡檢證明已根除支原體后，再加正常培養(yǎng)液培養(yǎng)傳代3-4次。
（一）運(yùn)用抗生素
抗生素對殺滅細(xì)菌較有用。聯(lián)合用藥比單獨用藥作用好。防范用藥比污染后再用藥作用好。防范用藥一般用雙抗生素（青霉素100u/mL加鏈霉素100μg/mL），污染后根除用藥需選用大于常用量5～10倍的沖洗法，于加藥后作用24～48小時，再換常規(guī)培養(yǎng)液。
此法在污染早期或許有用。所用抗生素品種除青霉素、鏈霉素外，還可用慶大霉素、卡那霉素、多粘菌素、四環(huán)素、制霉菌素等。常用400～800μg/mL卡那霉素或200μg/mL四環(huán)素處理，每隔2～3日換液1次，傳1～2代進(jìn)行治療。
近年來有報導(dǎo)，4-氟，2-羥基喹啉（Ciprofloxacin,Cip）、截耳素衍生物（Pleu-romutilinderivative,BM-Cyclin2:BM-1和四環(huán)素衍生物（BM-2）等三種抗生素單用或合用對殺滅支原體有用。
這三種抗生素均用配成250X濃縮液，-20℃保存?zhèn)溆茫\(yùn)用濃度Cip為10μg/mL，BM-1為10μg/mL，BM-2為5μg/mL。運(yùn)用時先吸除污染的培養(yǎng)液，參與含BM-1的RPMI1640培養(yǎng)液，3天后再吸除培養(yǎng)液，參與含BM-2的RPMI1640培養(yǎng)液，培養(yǎng)4天，如此接連3個輪次，直至用33258熒光染色鏡檢證明已根除支原體后，再加正常培養(yǎng)液培養(yǎng)傳代3-4次。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
