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聯(lián)系人：王宇豪
技術文章
怎么知道您的細胞正遭受支原體摧殘呢
點擊次數(shù)：431 發(fā)布時間：2019/8/22 10:39:57
培養(yǎng)細胞時，
發(fā)現(xiàn)細胞增殖變慢、
形態(tài)漸漸改變，
是血清或培養(yǎng)基的問題嗎？
很有可能是你的細胞污染了~~~~~
支原體污染
細胞污染可分為細菌、霉菌、酵母菌、支原體污染，其中支原體污染發(fā)生的概率>50%。支原體(Mycoplasma) 是*小的原核生物，約0.1-0.3μm，可穿透0.22-0.45 μm 過濾膜 （BI血清經過3次0.1μm濾膜并且檢測支原體)。
支原體污染棘手的原因是沒有如其他污染源“立即可辨”的現(xiàn)象，支原體污染侵襲細胞但是并不一定致死。如果您的細胞出現(xiàn)如下狀態(tài)：增殖變慢、形態(tài)變差、培養(yǎng)液變黃但是沒有渾濁，說明您的細胞可能正遭受支原體的摧殘��！
受支原體污染的293T 正常無污染的293T
支原體檢測
怎么知道您的細胞正遭受支原體摧殘呢，常見的檢測方法幾種：
1.分離培養(yǎng)法
將可疑樣本接種到支原體培養(yǎng)基中，觀察菌落生成。缺點:培養(yǎng)時間長，須3~5周才能判斷。
2.DNA熒光染色法
利用熒光染劑 (Bisbenzimide, Hoechst 33258) 檢測支原體污染，但若有些細胞易有熒光背景，可能會干擾結果判讀。
3.PCR法
利用特異性引物，經PCR反應檢測支原體DNA，靈敏且快速。
BI EZ-PCR支原體檢測試劑盒：采用PCR法，簡化了細胞培養(yǎng)中支原體污染的檢測過程，可檢測出細胞培養(yǎng)實驗中常見的支原體污染。
試劑盒中包含獨特的反應混合液，以及PCR中需要的所有試劑。使用者只需備有樣品，*后產物跑完膠后，如有一個270bp的片段，則代表有支原體污染，整個檢測過程耗時約4小時。
怎么知道您的細胞正遭受支原體摧殘呢，常見的檢測方法幾種：
1.分離培養(yǎng)法
將可疑樣本接種到支原體培養(yǎng)基中，觀察菌落生成。缺點:培養(yǎng)時間長，須3~5周才能判斷。
2.DNA熒光染色法
利用熒光染劑 (Bisbenzimide, Hoechst 33258) 檢測支原體污染，但若有些細胞易有熒光背景，可能會干擾結果判讀。
3.PCR法
利用特異性引物，經PCR反應檢測支原體DNA，靈敏且快速。
BI EZ-PCR支原體檢測試劑盒：采用PCR法，簡化了細胞培養(yǎng)中支原體污染的檢測過程，可檢測出細胞培養(yǎng)實驗中常見的支原體污染。
試劑盒中包含獨特的反應混合液，以及PCR中需要的所有試劑。使用者只需備有樣品，*后產物跑完膠后，如有一個270bp的片段，則代表有支原體污染，整個檢測過程耗時約4小時。
原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
