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ELISA這些常見實驗方法的優(yōu)缺點
點擊次數(shù)：289 發(fā)布時間：2019/6/27 9:59:41
ELISA實驗是科研人員常常用到的實驗辦法。很多人覺得ELISA很簡單，其實不然。今天小編就帶我們了解下ELISA實驗的原理和常見辦法。
實驗原理
1.包被：抗原/抗體，固相化
2.反響： 1)待測抗體/抗原； 2)酶標(biāo)抗原/抗體
3.洗刷：使結(jié)合在固相上的抗原抗體復(fù)合物與未結(jié)合的分別
4.底物顯色：定性/定量剖析
常用辦法
1.間接法
檢測抗體常用的辦法, 首要用于對病原體抗體的檢測。
優(yōu)勢：二抗能夠加強(qiáng)信號，并且有多種選擇能做不同的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保存它多的免疫反響性。
缺陷：交互反響發(fā)作的機(jī)率較高
2.雙抗體夾心法
檢測大分子抗原常用的辦法。
優(yōu)勢：高活絡(luò)、高專一性，抗原無須事前純化。
缺陷：抗原必定得具有兩個以上的抗體結(jié)合部位。
3.競爭法
檢測小分子半抗原（藥物、激素等）。
優(yōu)勢：可適用比較不純的樣本，并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
缺陷：整體的敏感性和專一性都較差。
實驗原理
1.包被：抗原/抗體，固相化
2.反響： 1)待測抗體/抗原； 2)酶標(biāo)抗原/抗體
3.洗刷：使結(jié)合在固相上的抗原抗體復(fù)合物與未結(jié)合的分別
4.底物顯色：定性/定量剖析
常用辦法
1.間接法
檢測抗體常用的辦法, 首要用于對病原體抗體的檢測。
優(yōu)勢：二抗能夠加強(qiáng)信號，并且有多種選擇能做不同的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保存它多的免疫反響性。
缺陷：交互反響發(fā)作的機(jī)率較高
2.雙抗體夾心法
檢測大分子抗原常用的辦法。
優(yōu)勢：高活絡(luò)、高專一性，抗原無須事前純化。
缺陷：抗原必定得具有兩個以上的抗體結(jié)合部位。
3.競爭法
檢測小分子半抗原（藥物、激素等）。
優(yōu)勢：可適用比較不純的樣本，并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
缺陷：整體的敏感性和專一性都較差。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
