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技術文章
ELISA試劑盒大部分對檢測有干擾的物質
目前ELISA試劑盒檢測的樣本中，除了細胞上清外，還有比較大的一部分是血清和血漿樣本。對于ELISA試劑盒客戶來說，在實驗中可能用到不同的樣本，如何辨別所購的ELISA試劑盒能否測手中的樣本呢？對于zui常見的細胞上清，我們大家知道，培養(yǎng)細胞過程中，無特別情況一般是10%的牛血清加入培養(yǎng)基中，經過培養(yǎng)后，細胞的吸收消耗，zui后細胞上清中蛋白含量會很少，而且對于一般牛血清生產的廠家來說，在生產過程中已經去除了，所以對一般ELISA而言，不會影響抗體抗原的結合。
1、如廠家沒有提供專門用于血清血漿樣本的緩沖液，那么只要用已知濃度的待測指標蛋白加入所測種屬的血清作為樣本加樣和用已知濃度的待測指標蛋白加入PBS緩沖液中同時檢測對比，ELISA試劑盒即可知道該試劑盒是否可以直接用來測血清血漿樣本。
2、如廠家沒有提供專門用于血清血漿樣本的緩沖液，只是有一個籠統(tǒng)的或統(tǒng)一的稀釋液，那么只要用已知濃度的待測指標蛋白加入所測種屬的血清直接加樣和用已知濃度的待測指標蛋白加入廠家提供的統(tǒng)一的緩沖液中同時檢測，也可得出該試劑盒是否可直接用來檢測血清血漿樣本。
3、如廠家提供專門用于血清血漿樣本的緩沖液，可用已知濃度的待測指標蛋白加入所測種屬的血清直接加樣和用緩沖液按說明書分別加樣，也可得出結果。
如該種類型ELISA試劑盒樣本總量如為100μl的話，一般而言，會是50μl的樣本加樣量和50μl的特定的緩沖液。
在使用試劑盒的過程，可將已知濃度的蛋白用血清或血漿調配到試劑盒標定的檢測限的zui高值的2倍，加入50μl做兩孔，一孔補入常規(guī)的50μl標準品稀釋液，ELISA試劑盒一孔補入50μl樣本分析緩沖液，即可區(qū)分出效果來，有時候，有些廠家為了達到“消除”的效果，在樣本分析緩沖液中加入待測目標蛋白，為了鑒別出這種情況，也可直接加入樣本分析緩沖液做一孔，同時做對比，這樣可試出試劑盒中的針對血清血漿樣本的緩沖液是否真的有效。
原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司
