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幾種常見(jiàn)的微生物酶類實(shí)驗(yàn)
點(diǎn)擊次數(shù)：497 發(fā)布時(shí)間：2019/3/15 17:18:06
自然界中的很多微生物都具有產(chǎn)酶的特性，其中*常見(jiàn)的四種分別是過(guò)氧化氫酶、氧化酶、凝固酶和DNA酶。下面就這四種酶的檢驗(yàn)方法做一下介紹。
1、過(guò)氧化氫酶實(shí)驗(yàn)
很多細(xì)菌都可以產(chǎn)過(guò)氧化氫酶，過(guò)氧化氫酶能夠催化過(guò)氧化氫，釋放出氧氣，從而產(chǎn)生氣泡。檢驗(yàn)方法是取3%過(guò)氧化氫溶液0.5ML,滴加于不含血液的細(xì)菌瓊脂培養(yǎng)基上，或者取1-3ML滴加到10ML的菌懸液中。如果培養(yǎng)物中出現(xiàn)氣泡則為陽(yáng)性。做過(guò)氧化氫酶實(shí)驗(yàn)時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：1、細(xì)菌要新鮮。2因?yàn)榧t細(xì)胞中含有過(guò)氧化氫酶，可能出現(xiàn)假陽(yáng)性，所以不能用血瓊脂平板做過(guò)氧化氫酶實(shí)驗(yàn)。
2、氧化酶實(shí)驗(yàn)
具有氧化酶的細(xì)菌，能夠氧化對(duì)苯二胺，生成有色的醌類化合物。檢驗(yàn)方法是取潔凈的濾紙一小塊，涂抹菌苔少許，滴加一滴10g/L對(duì)苯二胺溶液于菌落上，觀察顏色變化。如果立即呈粉紅色并迅速轉(zhuǎn)為紫紅色者為陽(yáng)性。做該類實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意不能采用在含葡萄糖培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落，因?yàn)槠咸烟前l(fā)酵可抑制氧化酶的活性。
3、凝固酶實(shí)驗(yàn)
金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生游離的凝固酶，從而使血漿凝固。檢驗(yàn)方法是取兩支試管，分別加入0.5ML血漿（可適當(dāng)稀釋），挑取菌落加入到試管中，用已知的陽(yáng)性菌株作為對(duì)照，37攝氏度下水浴3-4小時(shí)。血漿凝固者為陽(yáng)性。
4、DNA酶實(shí)驗(yàn)
某些細(xì)菌可產(chǎn)胞外DNA酶，DNA酶可以水解DNA長(zhǎng)鏈，形成的寡核苷酸可溶于酸，當(dāng)在菌落平板上加入酸后，若在菌落周圍出現(xiàn)透明環(huán)，則表明該菌具有DNA酶。檢測(cè)方法是將待檢菌落點(diǎn)狀接種于DNA瓊脂平板上，35攝氏度培養(yǎng)18-24小時(shí)，在細(xì)菌生長(zhǎng)物上加一層1MOL/L鹽酸(使菌落浸沒(méi)），如果菌落周圍出現(xiàn)透明環(huán)則為陽(yáng)性，無(wú)透明環(huán)為陰性。需注意的是革蘭氏陽(yáng)性菌中只有金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生DNA酶，因此此方法可用來(lái)鑒定金黃色葡萄球菌。
1、過(guò)氧化氫酶實(shí)驗(yàn)
很多細(xì)菌都可以產(chǎn)過(guò)氧化氫酶，過(guò)氧化氫酶能夠催化過(guò)氧化氫，釋放出氧氣，從而產(chǎn)生氣泡。檢驗(yàn)方法是取3%過(guò)氧化氫溶液0.5ML,滴加于不含血液的細(xì)菌瓊脂培養(yǎng)基上，或者取1-3ML滴加到10ML的菌懸液中。如果培養(yǎng)物中出現(xiàn)氣泡則為陽(yáng)性。做過(guò)氧化氫酶實(shí)驗(yàn)時(shí)要注意以下幾點(diǎn)：1、細(xì)菌要新鮮。2因?yàn)榧t細(xì)胞中含有過(guò)氧化氫酶，可能出現(xiàn)假陽(yáng)性，所以不能用血瓊脂平板做過(guò)氧化氫酶實(shí)驗(yàn)。
2、氧化酶實(shí)驗(yàn)
具有氧化酶的細(xì)菌，能夠氧化對(duì)苯二胺，生成有色的醌類化合物。檢驗(yàn)方法是取潔凈的濾紙一小塊，涂抹菌苔少許，滴加一滴10g/L對(duì)苯二胺溶液于菌落上，觀察顏色變化。如果立即呈粉紅色并迅速轉(zhuǎn)為紫紅色者為陽(yáng)性。做該類實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意不能采用在含葡萄糖培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落，因?yàn)槠咸烟前l(fā)酵可抑制氧化酶的活性。
3、凝固酶實(shí)驗(yàn)
金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生游離的凝固酶，從而使血漿凝固。檢驗(yàn)方法是取兩支試管，分別加入0.5ML血漿（可適當(dāng)稀釋），挑取菌落加入到試管中，用已知的陽(yáng)性菌株作為對(duì)照，37攝氏度下水浴3-4小時(shí)。血漿凝固者為陽(yáng)性。
4、DNA酶實(shí)驗(yàn)
某些細(xì)菌可產(chǎn)胞外DNA酶，DNA酶可以水解DNA長(zhǎng)鏈，形成的寡核苷酸可溶于酸，當(dāng)在菌落平板上加入酸后，若在菌落周圍出現(xiàn)透明環(huán)，則表明該菌具有DNA酶。檢測(cè)方法是將待檢菌落點(diǎn)狀接種于DNA瓊脂平板上，35攝氏度培養(yǎng)18-24小時(shí)，在細(xì)菌生長(zhǎng)物上加一層1MOL/L鹽酸(使菌落浸沒(méi)），如果菌落周圍出現(xiàn)透明環(huán)則為陽(yáng)性，無(wú)透明環(huán)為陰性。需注意的是革蘭氏陽(yáng)性菌中只有金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生DNA酶，因此此方法可用來(lái)鑒定金黃色葡萄球菌。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
